PI3k-Akt信号通路在2型糖尿病大鼠易发心房颤动中的介导作用

发布时间：2017-08-20 07:05

  本文关键词：PI3k-Akt信号通路在2型糖尿病大鼠易发心房颤动中的介导作用

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【摘要】：目的:探讨糖尿病大鼠易发心房颤动的结构与电重构机制及PI3k-Akt信号通路在其中的作用。方法:24只(随机分为3组)8周龄雄性糖尿病大鼠,以及同源的8周龄京都威斯特(WKY)大鼠,共4组,每组8只;①GK+IGF组:糖尿病+PI3K激动剂(胰岛素样生长因子,IGF-1),每天尾静脉注射IGF-1 1.5μg/kg,持续4周;②GK+IGF+L-NAME组:糖尿病+IGF-1+e NOS抑制剂(N-硝基-L-精氨酸甲酯,L-NAME),每天尾静脉注射L-NAME 1.5μg/kg,30分钟后注射IGF-1 1.5μg/kg,持续4周;③GK组:糖尿病大鼠,每天尾静脉注射等量的生理盐水;④WKY组:对照组,每天尾静脉注射等量的生理盐水。用彩色多普勒超声检测大鼠左房前后径(LA)的改变;HE染色观察左心房肌细胞大小及形态;Masson染色分析测定左心房胶原纤维含量及分布;免疫组化分析左心房肌细胞内PI3K和e NOS的表达;免疫印迹(Western blot)检测大鼠左心房肌组织PI3K、p-e NOS的表达;多导电生理记录仪测量心房电参数,包括P波时限、PR间期、心房有效不应期(AERP)及离散度、房颤诱发率和持续时间。结果:1.HE染色显示:GK组和GK+IGF+L-NAME组心房肌细胞与WKY组比较明显增大且排列紊乱(P0.01);GK+IGF组与WKY组心房肌细胞相比大小相似,排列规则。2.Masson染色显示:GK组和GK+IGF+L-NAME组心房肌间质胶原沉积较WKY组明显(P0.01),GK+IGF组心房肌间质仅少量胶原沉积。3.超声检测:GK组和GK+IGF+L-NAME组较GK+IGF组和WKY组左房前后径增大,但无统计学差异(P0.05)。4.Western blot结果显示:GK+IGF组和WKY组心房肌细胞PI3K蛋白和p-e NOS蛋白表达水平明显高于GK组和GK+IGF+L-NAME组(P0.01)。5.电生理检测结果:与GK+IGF组、WKY组相比,⑴GK组和GK+IGF+L-NAME组P波时限明显延长(P0.01);⑵GK组和GK+IGF+L-NAME组PR间期明显延长(P0.05或P0.01);⑶GK组和GK+IGF+L-NAME组AERP离散度明显增加(P0.05)。⑷GK组与GK+IGF+L-NAME组房颤诱发率与房颤持续时间明显增加(P0.01)。⑸各组大鼠AERP无明显差异。⑹GK+IGF组与WKY组间,GK组和GK+IGF+L-NAME组间,P波时限、PR间期、AERP离散度及房颤诱发率与持续时间无明显差异(P0.05)。结论:1.2型糖尿病大鼠的左心房组织可发生结构重构和电重构,房颤易感性增加;2.PI3K-Akt-e NOS信号通路可能是介导糖尿病易发房颤的信号通路。
【关键词】：心房颤动 糖尿病大鼠 信号通路 结构重构 PI3K
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.75;R587.1
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-24
• 1 仪器与试剂12-14
• 1.1 仪器12-13
• 1.2 试剂13-14
• 2 实验动物与分组14-15
• 3 研究方法15-23
• 3.1 大鼠体重、血糖的测量15
• 3.2 超声心动图15
• 3.3 大鼠心脏标本制备15-16
• 3.4 心房肌组织化学染色16-19
• 3.4.1 苏木素-伊红染色16-17
• 3.4.2 马松三色胶原染色17-18
• 3.4.3 免疫组化染色18-19
• 3.5 western blot19-23
• 3.5.1 试剂配制19-20
• 3.5.2 制备SDS-PAGE胶20-21
• 3.5.3 制备SDS-PAGE胶21
• 3.5.4 蛋白样品变性、电泳21-22
• 3.5.5 凝胶转膜及其检测22-23
• 3.6 电生理检测23
• 4 统计学处理23-24
• 结果24-35
• 1. 实验大鼠一般情况24
• 2 大鼠体重24
• 3 大鼠心率、血糖变化24-25
• 4 大鼠超声心动图结果25-26
• 5 大鼠心肌形态改变26-28
• 6 大鼠心肌纤维分布及含量改变28-29
• 7 免疫组化结果29-32
• 8 Western blot:PI3K蛋白的表达及p-eNOS蛋白的表达32-33
• 9 电生理检测：房颤易感性33-35
• 讨论35-39
• 局限性39
• 结论39-40
• 参考文献40-43
• 综述43-51
• 参考文献47-51
• 致谢51

【参考文献】

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1 张正楠;何燕;曾志羽;刘浩;李金轶;黄伟强;凌云;邬江涛;纪蓝;卢运红;;交感神经对犬快速右心房起搏诱发阵发性心房颤动的影响[J];中华老年心脑血管病杂志;2014年02期

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本文编号：705187