原发性高血压病人血清miRNAs差异表达谱研究

发布时间：2017-08-24 03:43

  本文关键词：原发性高血压病人血清miRNAs差异表达谱研究

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【摘要】：目的:通过miRNA芯片技术获得原发性高血压病人和健康人血清中差异表达的miRNAs谱,通过qRT-PCR技术验证芯片结果的可靠性,生物信息学分析关键miRNAs调控的靶基因及所涉及的信号通路,阐明miRNA在高血压发生发展中的作用。方法:收集20例高血压病人和10例健康人的血清标本,Trizol试剂提取总RNA;采用miRNA基因芯片技术检测高血压病人和健康人血清中差异表达的miRNAs;运用qRT-PCR技术验证芯片筛选出的差异表达的两个miRNAs:miR-132和miR-155;通过生物信息学分方法分析miR-132和miR-155所调控的靶基因及涉及到的信号通路,分析miR-132和miR-155是如何调控信号通路影响高血压的发生发展。结果:1.获得高血压病人血清的差异miRNAs表达谱。高血压病人中,上调的miRNAs有33个;而下调的miRNAs有12个。2.高血压病人中,基因芯片检测发现,上调倍数最大的为miR-132,上调29.3389倍;下调倍数最大的为miR-155,下调-15.2452倍。3.20例高血压病人中,miR-132的相对平均值为102.8±9.3,10例健康人中,miR-132的相对平均值为5.2±0.5,上调倍数为24.2313倍。20例高血压病人中,miR-155的相对平均值为1.6±0.2,10例健康人中,miR-155的相对平均值为19.1±1.3,下调倍数为-12.2337倍,这两个miRNA分子在基因芯片中的表达趋势和q RT-PCR验证结果一致。4.miR-132调控的靶基因有261个,miR-155调控的靶基因有440个。261个miR-132调控的靶基因涉及的信号通路主要包括:VEGF、MAPK、p53、TGF-β、Wnt等信号通路;440个miR-155调控的靶基因涉及的信号通路主要包括:MAPK、Jak-STAT、mTOR、ErbB、TGF-β、细胞骨架等信号通路。结论:1.获得了高血压病人与健康人血清的miRNAs差异表达谱,在高血压血清中,上调的miRNAs有33个,下调的miRNAs有12个。2.基因芯片检测发现,高血压病人中,上调倍数最大的为miR-132;下调倍数最大的为miR-155。血清学样本检测发现,miR-132和miR-155表达水平与基因芯片结果一致。说明基因芯片结果可靠。3.生物信息学分析结果表明,miR-132和miR-155调控的靶基因涉及到信号通路功能复杂,其中MAPK、VEGR、p53、Jak-STAT信号通路可能在高血压发生发展中具有重要作用。
【关键词】：高血压 miRNA差异表达谱 miR-132 miR-155 基因芯片
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R544.11
【目录】：

• 中文摘要7-9
• Abstract9-12
• 第一章 引言12-16
• 1.1 高血压发病与研究现状12
• 1.2 miRNA与高血压12-13
• 1.3 miRNA芯片技术13-14
• 1.4 研究内容14-16
• 第二章 材料与方法16-20
• 2.1 材料16
• 2.2 实验方法16-20
• 第三章 结果20-28
• 3.1 细胞总RNA的抽提结果20
• 3.2 基因芯片图20-21
• 3.3 基因芯片检测到的差异表达miRNAs21-22
• 3.4 差异表达谱的聚类分析22-23
• 3.5 qRT-PCR检测miR-132，，miR-155表达水平23-24
• 3.6 miR-132和miR-155生物信息学分析24-28
• 第四章 讨论28-33
• 4.1 高血压病研究现状28
• 4.2 miRNA在高血压中的研究进展28-29
• 4.3 高血压miRNAs差异芯片结果分析29-30
• 4.4 miR-132与高血压30
• 4.5 miR-155与高血压30-31
• 4.6 展望31-33
• 结论33-35
• 参考文献35-43
• 文献综述 心血管疾病中microRNA研究进展43-53
• 参考文献49-53
• 攻读学位期间的科研成果53-55
• 致谢55

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本文编号：729022