鼻咽癌中STGC3相关蛋白质ANXA3与NNMT的表达及意义

发布时间：2017-10-21 14:19

  本文关键词：鼻咽癌中STGC3相关蛋白质ANXA3与NNMT的表达及意义

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【摘要】：目的：课题组前期采用蛋白质组学技术，从敲低STGC3基因表达的人鼻咽永生化上皮细胞NP69，筛选鉴定出83个差异表达蛋白质分子，本研究从中挑选高表达蛋白质膜粘蛋白3(annexin A3ANXA3)及低表达蛋白质尼克酰胺转移酶(nicotinamide N-methyltransferase NNMT)，进行实验验证，并分析ANXA3和NNMT蛋白质在鼻咽癌细胞及组织中表达的意义，探讨ANXA3和NNMT表达与STGC3基因的关系，为阐明STGC3基因在鼻咽癌发生发展中的作用提供实验依据。 方法：采用RT-PCR和Western-blot技术，，检测ANXA3和NNMT在敲低STGC3表达的NP69细胞系、鼻咽癌CNE1和CNE2细胞系及鼻咽癌组织中的表达；免疫组织化学染色，检测ANXA3和NNMT在鼻咽癌组织中的表达，分析ANXA3和NNMT表达与STGC3的关系及意义。 结果： RT-PCR结果显示：在STGC3低表达的NP69细胞（PRNAT-U6/shRNA-STGC3-NP69）、鼻咽癌CNE1及CNE2细胞、鼻咽癌组织均存在ANXA3基因mRNA表达水平增高，分别与细胞对照组(NP69细胞)和组织对照组（非鼻咽癌组织）比较，差异具有统计学意义(p0.05)；而NNMT基因的表达降低，与对照组间差异具有统计学意义(p0.05)；灰度扫描，计算相对表达量，ANXA3基因：NP69细胞0.366±0.036、STGC3低表达NP69细胞0.727±0.031、CNE1细胞0.737±0.051、CNE2细胞0.754±0.031、非鼻咽癌组0.358±0.015、鼻咽癌组0.667±0.031；NNMT基因：NP69细胞0.670±0.022、STGC3低表达NP69细胞0.362±0.055、CNE1细胞0.335±0.026、CNE2细胞0.375±0.042、非鼻咽癌组0.783±0.090、鼻咽癌组0.329±0.054。 Western-blot结果与RT-PCR检测结果一致：低表达STGC3的NP69细胞、鼻咽癌CNE1及CNE2细胞、鼻咽癌组织均存在ANXA3蛋白表达高表达，与对照组间差异具有显著意义(P0.05)；而各实验组均显示NNMT蛋白表达降低，与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)；经灰度扫描，计算相对表达量，ANXA3蛋白：NP69细胞0.530±0.050、STGC3低表达NP69细胞0.916±0.025、CNE1细胞0.856±0.038、CNE2细胞0.928±0.043、非鼻咽癌组织0.560±0.006、鼻咽癌组织0.933±0.031，NNMT蛋白：NP69细胞0.994±0.049、STGC3低表达NP69细胞0.696±0.030、CNE1细胞0.759±0.027、CNE2细胞0.742±0.024、非鼻咽癌组织0.868±0.041、和鼻咽癌组织0.582±0.093。 免疫组织化学染色结果显示：ANXA3蛋白表达定位于细胞浆和细胞膜，NNMT蛋白表达定位于细胞浆和细胞核，以细胞浆为主，鼻咽癌组织和对照组非鼻咽癌组织的阳性表达率分别为：ANXA3蛋白83.3%(鼻咽癌10/12)和23.1%(对照组3/13)，NNMT蛋白41.6%(鼻咽癌5/12)和84.6%(对照组11/13)；鼻咽癌组织中ANXA3蛋白阳性表达率高于组，而NNMT蛋白的阳性表达率则低于对照组，差异均具有统计学意义(P0.05)。 结论： 1. ANXA3在敲低STGC3低表达的人鼻咽上皮NP69细胞中表达增高，而NNMT表达降低。 2.鼻咽癌细胞CNE1， CNE2和组织中ANXA3表达增高，而NNMT表达降低。
【关键词】：鼻咽癌 STGC3 NP69 ANXA3 NNMT
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 主要英文缩写一览表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 技术路线12-13
• 材料与方法13-20
• 结果20-28
• 讨论28-31
• 结论31-32
• 参考文献32-38
• 综述38-46
• 参考文献43-46
• 附录一46-48
• 致谢48

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本文编号：1073816