海带多糖抗人鼻咽癌作用的实验研究

发布时间：2017-10-28 20:19

  本文关键词：海带多糖抗人鼻咽癌作用的实验研究

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【摘要】：目的鼻咽癌是中国东南部地区高发的头颈部恶性肿瘤，98％属于低分化鳞状鳞状细胞癌，目前主要采用以放疗为主，辅助化疗的综合治疗。常规放、化疗对鼻咽癌细胞有很强的杀伤作用，但是由于发挥作用时没有选择性，同时对人体正常组织产生严重损伤，出现较多严重并发症，严重影响的病人的治疗效果和生活质量。因此，，目前从天然动植物中寻找具有增强放化疗的抗癌作用，并能减轻放化疗造成损伤的高效低毒抗肿瘤药物，已成为抗肿瘤药物选择及减少治疗并发症研究的重要组成部分。海带多糖（laminaria japonica polysaccharides，LJP）是一种从海带中提取的含有多种单糖和硫酸基的水溶性杂多糖。大量研究证明海带多糖具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗突变、提高免疫力、防辐射等[1-4]，但其在鼻咽癌防治作用方面的研究较少，仅本课题组对其作用机理的初步探索实验[5-7]。本研究为进一步证明LJP对多种人鼻咽癌细胞的体外抑制作用，并寻找对LJP的敏感细胞株，通过对人鼻咽癌细胞株HONE1体内、外抑制作用的研究，探寻LJP抗鼻咽癌的作用机理。 方法体外实验采用MTT法检测不同浓度的LJP对人鼻咽癌HONE1、HNE1、5-8F、6-10B、CNE2、鼻咽部正常上皮NP69细胞凋亡作用的影响，选取HONE1细胞株，采用Hoechst33258荧光染色法和细胞划痕实验检测不同浓度LJP对人鼻咽癌HONE1细胞凋亡检测和迁移能力的影响；建立人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠皮下移植瘤模型，设立对照组和低、中、高LJP组行体内药物干预，通过透射电镜观察（transmission electronmicroscopy,TEM）LJP组和对照组对移植瘤癌细胞、血管内皮细胞及LJP组肝肾组织细胞和血管内皮细胞的影响，并采用Western blot（WB）法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、8、9以及VEGF蛋白的表达。 结果MTT结果显示LJP对多种人鼻咽癌细胞的增殖有明显的抑制作用，其作用具有浓度和时间依赖性，而对鼻咽部正常上皮细胞抑制作用较弱。Hoechst33258荧光染色法和细胞划痕实验提示随着LJP浓度的增加，人鼻咽癌HONE1染色细胞减少,而细胞核浓缩、核破裂的数量增多，并且具有抑制HONE1细胞迁移的作用。TEM结果提示癌细胞及癌组织内血管内皮细胞呈现凋亡特征的改变，肝肾正常组织细胞及血管内皮细胞则不受影响。WB检测结果提示，随着LJP浓度的增加，Bax/Bcl-2、Caspase-3、8、9蛋白的相对表达量增高（P＜0.05）；VEGF蛋白的相对表达量降低（P＜0.05）。 结论LJP能够抑制多种人鼻咽癌细胞的生长作用，对人正常鼻咽部细胞抑制作用较弱，并且具有抑制人鼻咽癌HONE1细胞迁移的作用，对人鼻咽癌HONE1裸鼠移植瘤的抑制作用可能是通过促进癌细胞凋亡及抑制移植瘤内血管生成，减少血液供应实现的。
【关键词】：人鼻咽癌细胞 海带多糖 抑制瘤 抑制作用 凋亡
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 缩略词表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-12
• 第一部分 海带多糖体外抑制鼻咽癌细胞的实验研究12-31
• 1 材料12-13
• 2 试验方法13-19
• 3 实验结果19-28
• 4 讨论28-31
• 第二部分 海带多糖对人鼻咽癌细胞株 HONE1 裸鼠移植瘤的抑制作用31-46
• 1 实验材料31-33
• 2 试验方法33-39
• 3 实验结果39-43
• 4 讨论43-46
• 全文总结46-48
• 参考文献48-51
• 茶多酚抑制鼻咽癌及辐射防护作用的研究进展51-62
• 参考文献58-62
• 海带多糖抑制鼻咽癌及放疗防护作用的研究进展62-68
• 参考文献66-68
• 致谢68-69
• 攻读学位期间发表文章69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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1 孙文忠;海带多糖抗大鼠颌下腺辐射损伤以及鼻咽癌裸鼠移植瘤的实验研究[D];广西医科大学;2012年

本文编号：1109803