慢病毒介导RNA干扰抑制CCR3基因表达对小鼠嗜酸性细胞增殖及凋亡的影响

发布时间：2017-11-03 20:40

  本文关键词：慢病毒介导RNA干扰抑制CCR3基因表达对小鼠嗜酸性细胞增殖及凋亡的影响

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【摘要】：目的： 运用慢病毒介导RNA干扰抑制CCR3基因在嗜酸性细胞上的表达，观察其对小鼠嗜酸性细胞增殖和凋亡的影响，为下一步基因治疗变应性鼻炎体内实验奠定基础。 方法： 体外分离、原代培养小鼠嗜酸性细胞并转导shRNA-mCCR3慢病毒颗粒，据预试验最优转导条件感染嗜酸性细胞，48h后收集细胞进行实验。采用QPCR和Western blot法检测转导前后嗜酸性细胞中CCR3mRNA和蛋白表达的变化。采用MTS法和TUNEL法检测靶向干扰CCR3基因对嗜酸性细胞增殖和凋亡的影响。 结果： （1）QPCR和Western blot结果表明，，与空白对照组和阴性对照组相比，感染shRNA-mCCR3慢病毒颗粒的嗜酸性细胞在mRNA水平和蛋白水平CCR3的表达降低，差异都有统计学意义（P0.05）。 （2）MTS和TUNEL实验结果表明，与空白对照组和阴性对照组相比，感染shRNA-mCCR3慢病毒颗粒的嗜酸性细胞增值率下降，差异有统计学意义（P0.05)，细胞凋亡率增加，差异有统计学意义（P0.05）。 结论： （1）成功构建了小鼠CCR3基因RNAi慢病毒载体。 （2）RNAi靶向沉默CCR3基因对嗜酸性细胞具有生长抑制作用并能诱导其凋亡。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R765.21

【参考文献】

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1 廖兵;小鼠嗜酸性细胞CCR3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定[D];南昌大学;2012年

本文编号：1137828