色素上皮衍生因子多肽对氧诱导小鼠视网膜病新生血管的抑制作用

发布时间：2017-11-06 02:36

  本文关键词：色素上皮衍生因子多肽对氧诱导小鼠视网膜病新生血管的抑制作用

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【摘要】：目的：观察本课题组自行研制的色素上皮衍生因子(PEDF)多肽对高氧诱导新生小鼠视网膜病新生血管的抑制作用。方法：C57BL/6J新生小鼠在生后(P)第7天至12天日龄(P7-P12)吸入75%高氧后,返回空气中,制备氧诱导视网膜病(0IR)小鼠模型。通过两种方式给予OIR小鼠PEDF多肽,即玻璃体腔内注射和直接滴眼。玻璃体腔内注射组选择右眼注射,采用不同的注射浓度(0.5μg/μL,1μg/μL,2μL/μL),注射量均为1μL,注射时间均为P12、P14各一次,左眼作为自身对照。直接滴眼组亦采用不同的滴眼浓度(0.5μg/μL,1μg/μL,2μL/μL)滴入量均为3 μμL,滴入时间均为P12-P16连续5 d,每天一次。各组在P17取材做视网膜铺片和切片,对视网膜新生血管进行形态观察和新生血管内皮细胞核计数的定量研究。最后,各组取最低剂量的亚组,通过实时荧光PCR及免疫组化的方式,检测各亚组PEDF-mRNA及PEDF蛋白的表达水平,与OIR组及空气组进行对比。结果：(1)注射组不同给药浓度结果：在P12、P14各一次右眼注射3种剂量的PEDF多肽,计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核,结果显示0.5μ∥μL,1μg/μL,2μ/μL组右眼细胞核数分别为(44.41±1.46)个、 (43.46±1.20)个(38.06+0.95)个,其中0.5 μμg/μμL与1μg/μL组无统计学差异,2μg/μL组细胞核数低于1μg/μL组,差异有统计学意义(P0.01)。三组右眼细胞核数均低于OIR组(69.51±1.74个),差异具有统计学意义(P0.01)。三组右眼细胞核数亦均低于左眼组(69.12±+1.60个),差异具有统计学意义(P0.01)。而OIR组与玻璃体腔内注射左眼组比较差异无统计学意义(P=0.839)。(2)滴眼组不同给药浓度结果：在P12～P16连续5d每天一次双眼滴入3种剂量的PEDF多肽,计数新生血管内皮细胞核,结果显示0.5 μg/μL,1μg/μL,2μg/μL组细胞核数分别为(48.81±1.18)个、(52.85±1.68)个、 (50.96±1.72)个,三组之间两两比较均无统计学差异(P0.05)。三组细胞核数均低于OIR组,差异具有统计学意义(P0.01)。(3)注射组及滴眼组抑制血管新生作用的比较：结果显示注射组细胞核数均低于滴眼组,差异具有统计学意义(P0.01)。(4)实时荧光PCR检测空气组、OIR组、0.5μg/μL注射组(OIR iv0.5μg/μL组)、0.5μg/μL滴眼组(OIR dr0.5μg/μL组)视网膜PEDF-mRNA表达水平：结果显示后三组之间无统计学差异,但均低于空气组,差异具有统计学意义(P0.01)。(5)免疫组化检测空气组、OIR组、OIR iv0.5 μg/μL组、OIR dr0.5 μg/μL组视网膜色素上皮层PEDF蛋白表达水平：结果显示后三组之间无统计学差异,但均低于空气组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论：玻璃体腔内注射PEDF多肽及直接滴入PEDF多肽均能对高氧诱导新生小鼠的视网膜新生血管有显著的抑制作用。玻璃体腔内注射的效果存在剂量依赖性,2μg/μL组抑制作用更佳。滴眼组的效果未表现出剂量依赖性,比注射组抑制作用较弱,可能需要更高的浓度方能显示更好的效果。本实验结果可能为早产儿视网膜病的药物治疗提供依据。
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R774.1

【参考文献】

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1 朱丽;陈超;石文静;王玉环;单海冬;赵培泉;;早产儿视网膜病多中心筛查及发病率调查[J];中华围产医学杂志;2006年06期

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本文编号：1147009