SMP30及CaM在正常人及不同年龄白内障患者晶状体上皮细胞中的表达研究

发布时间：2017-11-22 19:23

  本文关键词：SMP30及CaM在正常人及不同年龄白内障患者晶状体上皮细胞中的表达研究

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【摘要】：目的本实验通过检测两种钙结合蛋白-SMP30及CaM在正常人及不同年龄白内障患者LECs的表达情况。以了解这两种蛋白在正常人和白内障患者LECs的表达是否存在差异性、在不同年龄白内障患者LECs的表达是否有年龄相关性，及二者之间的关系。同时应用正常细胞培养技术，观察正常培养条件下人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞株的形态改变，衰老状态的出现，同时检测SMP30的表达是否具年龄相关性。 方法收集正常青年组(19~45岁)晶状前囊膜12例；白内障患者按不同年龄收集1~18岁儿童组、19~45岁青年组、46~60岁中年组、＞60岁老年组晶状体前囊膜各12例。对所取囊膜进行固定、脱水、石蜡包埋、切片。采用间接免疫荧光法检测LECs中SMP30及CaM的表达情况。采用体外正常培养技术，正常培养人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞，倒置显微镜观察其形态学改变并拍照，检测β-半乳糖苷酶的含量了解细胞衰老情况，同时细胞爬片免疫荧光法检测其SMP30的表达。 结果SMP30及CaM在所有标本LECs中均有表达，且均主要在细胞浆，胞核少量表达。SMP30在白内障青年组（0.181±0.034）LECs的表达明显高于正常青年组（0.087±0.007）(P＜0.01)； SMP30在儿童组（0.185±0.020）、青年组、中年组（0.207±0.018）白内障患者LECs的表达无统计学差异(所有P值均＞0.05)，但在老年组（0.126±0.027）的表达明显低于其它三组(P值均＜0.01）。CaM在白内障青年组（0.507±0.288）LECs的表达也高于正常青年组（0.297±0.007）(P＜0.05)；而CaM在不同年龄白内障组患者儿童组（0.624±0.207）、青年组（0.507±0.288）、中年组（0.704±0.168）、老年组（0.5607±0.288）LECs间的表达无统计学差异（所有P值均＞0.05）。五组中所有样本LECs中CaM的表达均较SMP30高，差异具有统计学意义（P值均＜0.05）。SRA01/04细胞株中，8th代细胞呈梭形或椭圆形，β-半乳糖苷酶的阳性细胞率＜5%，SMP30平均IOD为0.0869±0.0148；但28th代细胞形态改变，由梭型变成椭圆形或圆形，细胞变大，胞浆变少，胞浆出现空泡，胞核色淡染，β-半乳糖苷酶的阳性细胞＞85%，，认为出现衰老，SMP30（0.0130±0.0016）表达明显低于8th代细胞（P值均＜0.05）。 结论SMP30及CaM表达于正常人及白内障患者LECs。SMP30及CaM在白内障患者LECs的表达均较正常人高，可能是晶状体损伤的标志，作为人LECs中一个保护因子，发生白内障时反应性增高。SMP30在白内障患者LECs及SRA01/04表达均具年龄相关性，＞60岁时其表达量的下降是年龄相关性白内障发生的原因之一。CaM在白内障患者LECs的表达无年龄相关性。CaM在所有样本LECs中的表达均较SMP30高，二者在人LECs的钙调节中可能起协同作用。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R776.1

【参考文献】

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本文编号：1215799