晚期糖基化终产物对C57小鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及其受体表达的影响

发布时间：2017-12-10 11:04

  本文关键词：晚期糖基化终产物对C57小鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及其受体表达的影响

  更多相关文章： 糖基化终产物 高级 螺旋神经节细胞 细胞 培养的 细胞凋亡 老年性聋

【摘要】：目的： 研究晚期糖基化终产物(AGEs)对体外培养的小鼠耳蜗螺旋神经节细胞（SGCs）凋亡及其受体（RAGE）表达的影响，探讨AGEs诱导SGCs凋亡的可能作用途径，分析老年性聋神经型的可能致病机制。 方法： 取出生后3～5天C57BL/6J新生小鼠，利用切割分离+酶消化法分离出SGCs，并进行体外培养。将培养4天的SGCs用4％多聚甲醛室温固定30min，以小鼠源神经微丝蛋白抗体（NF-L+H）为一抗，按照免疫荧光法对所培养细胞进行免疫细胞荧光染色，对SGCs作出鉴定。以RAGE抗体为一抗，按照免疫荧光法及免疫组化法，对SGCs上的RAGE进行鉴定。将培养第4天的细胞加入不同浓度的AGEs，，作用不同的时间，运用原位末端转移酶标记技术法（TUNEL法），在荧光显微镜下观察不同浓度、不同时间AGEs对培养的SGCs凋亡的影响。并采用采用实时荧光定量逆转录PCR（Real time RT-PCR）方法检测不同浓度、不同时间AGEs作用培养的SGCs后RAGE的mRNA的表达。 结果： SGCs原代培养获得成功，经神经微丝蛋白抗体(NF-H)抗体免疫荧光法染色，其胞质及突起均呈阳性反应，染成绿色荧光。SGCs经RAGE抗体免疫细胞荧光法及免疫组织化学染色，其胞质及突起均呈阳性反应，分别染成绿色荧光及棕色表现。AGEs加入体外培养的SGCs中，可明显诱导SGCs凋亡，凋亡率与剂量、时间呈正相关。在发生凋亡的同时有RAGE mRNA表达的增强。 结论： 新生小鼠SGCs上即存在着RAGE，AGEs对SGCs有诱导凋亡的作用，该作用可能通过RAGE介导。AGEs促使SGCs凋亡可能是老年性聋神经型的发病机制之一。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R764.431

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 ;中国人口老龄化发展趋势预测研究报告[J];中国妇运;2007年02期

2 高险亭;林昶;;晚期糖基化终产物受体在小鼠耳蜗中表达的初步探讨[J];中华耳科学杂志;2012年01期

3 敖华飞;王正敏;穆美云;;耳蜗毛细胞静纤毛束生后发育的实验研究[J];中国眼耳鼻喉科杂志;1996年03期

本文编号：1274206