siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的研究

发布时间：2017-12-17 15:26

  本文关键词：siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的研究

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【摘要】：目的:探讨siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的变化。方法:利用RNA干扰技术干扰喉癌Hep-2细胞β-catenin基因,用RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白水平检测目的基因干扰效果;实验分为siRNA-β-catenin-Hep-2干扰组、阴性对照组、空白对照组;MTT法检测不同浓度顺铂对3组细胞的增殖抑制率并计算半数抑制有效药物浓度(IC50值),流式细胞仪检查3组细胞相同浓度顺铂刺激后凋亡率的变化。结果:合成的β-catenin-siRNA干扰片段可以特异性下调β-catenin基因mRNA和蛋白的表达水平;RTPCR检测说明siRNA-β-catenin-Hep-2干扰组mRNA相对表达量较空白对照组下降达70%(P0.05),Western blot结果显示干扰组β-catenin蛋白相对表达为(0.545±0.111),较空白对照组(1.507±0.139)和阴性对照组(1.429±0.089)明显下降(P0.05)。通过计算软件得出顺铂对3组细胞的IC50值,β-cateninRNAi干扰组和空白对照组IC50分别值为(5.81±0.46)、(10.10±1.01)μg/ml,2组之间的差异有统计学意义(P0.01)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,β-catenin-RNAi干扰组细胞凋亡率为(26.15±0.60)%,明显高于空白对照组的(14.16±0.05)%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:干扰β-catenin的表达能有效增强喉癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,与顺铂协同促进Hep-2细胞的凋亡。这可为减少喉癌化疗药物的用量及减轻其不良反应提供了理论支持。
【作者单位】： 广州市第十二人民医院耳鼻咽喉科;
【基金】：化疗药物促喉癌细胞转化为干细胞样肿瘤细胞的机制研究(广东省自然科学基金)
【分类号】：R739.65
【正文快照】： 喉癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率有逐年上升的趋势,尽管近年来恶性肿瘤的治疗取得了很大进展,但喉癌患者的术后复发、转移仍然是其治疗瓶颈。术前、术后的放化疗对于减少手术切除范围、保留喉功能及预防术后复发的作用越来越突出,顺铂至今仍是喉癌化疗的一线药物,其耐

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本文编号：1300640