左卡尼汀对体外高糖培养鼠视网膜神经细胞的保护作用及机制探讨

发布时间：2017-12-20 20:00

  本文关键词：左卡尼汀对体外高糖培养鼠视网膜神经细胞的保护作用及机制探讨　出处：《青岛大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 左卡尼汀 视网膜神经细胞 氧化应激 线粒体

【摘要】：目的探讨左卡尼汀(L-carnitine, LC)对高糖损伤鼠视网膜神经细胞的保护作用及可能的机制。 方法选择出生1-3d的SD大鼠,取视网膜,0.125%的胰蛋白酶消化制备单细胞悬液后进行体外培养。倒置相差显微镜观察细胞生长形态,采用Thy1.1单克隆抗体和微管相差蛋白-2多克隆抗体(Map2)对培养4d的细胞进行鉴定。台盼蓝拒染实验观察不同浓度葡萄糖作用下视网膜神经细胞生长状况,并计算细胞存活率。待细胞达80%融合时进行实验分组如下：正常细胞培养组(对照组)、单纯LC组、高糖损伤组、LC保护组、N-乙酰半胱氨酸(NAC), MTT法检测各组细胞活力；流式细胞仪测各组细胞内活性氧(ROS)水平；Hoechst33342染色观察各组细胞凋亡率；JC-1染色后采用流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位的变化。 结果体外培养细胞免疫荧光双标鉴定显示大部分为Thy1.1及Map2阳性。通过台盼蓝拒染实验比较不同浓度葡萄糖及不同干预时间视网膜神经细胞存活率,最终选择30mmol/L葡萄糖干预48h建立高糖损伤模型。MTT结果显示高糖损伤组细胞活性显著下降(P0.01),左卡尼汀保护组细胞活力较高糖组显著提高(P0.01)。高糖损伤组ROS水平高于正常细胞组,差别有统计学意义(P0.01),LC保护组ROS水平显著低于高糖损伤组(P0.01)。高糖损伤组Hoechst33342染色可见大量细胞出现凋亡的形态学改变(如细胞核致密浓染、核固缩、边缘化等),细胞凋亡率显著高于正常组(P0.01),LC保护组细胞凋亡率显著低于高糖损伤组(P0.01)。高糖损伤组线粒体膜电位较正常细胞组显著降低(P0.01),而Lc保护组较高糖损伤组线粒体膜电位显著升高(P0.05)。 结论左卡尼汀对高糖引起的视网膜神经细胞氧化应激损伤具有保护作用,其保护机制可能与其增强细胞的抗氧化能力、抑制细胞凋亡及改善线粒体功能有关。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 戴超;卞修武;廖琼;史景泉;;糖基化白蛋白促内皮细胞小管样结构形成及其机制[J];第三军医大学学报;2007年12期

2 陈雨;朱晓华;;糖尿病视网膜病变发病机制的研究进展[J];国际眼科杂志;2006年02期

3 刘卫,张勇进;糖尿病性视网膜病变[J];国外医学.眼科学分册;2005年05期

4 崔丹;王哲;杨向红;;糖基化终末产物对体外诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞血管形成的影响[J];中国动脉硬化杂志;2009年09期

5 张亚洁;许红霞;曾凯宏;糜漫天;;牛磺酸对高糖培养下视网膜Mü ller细胞GFAP和TAUT表达的影响[J];现代生物医学进展;2007年05期

6 张苗,钱敏,魏建冬,孙诤,梅长林,徐洪实,顾书华;血透病人左旋肉碱缺乏及补充疗法的临床研究[J];江苏医药;1998年12期

7 罗南萍,黄厚斌,杨道理,徐军,刘忠伦;血管内皮细胞生长因子、γ干扰素及一氧化氮血浆水平与糖尿病视网膜病变的关系[J];中华内分泌代谢杂志;2001年04期

，

本文编号：1313209