基因重组PACAP 27衍生多肽RP2制备及促角膜上皮细胞增殖研究

发布时间：2017-12-25 00:24

  本文关键词：基因重组PACAP 27衍生多肽RP2制备及促角膜上皮细胞增殖研究　出处：《中国生物工程杂志》2015年03期 　论文类型：期刊论文

  更多相关文章： 基因重组 垂体腺苷酸环化酶激活肽 重组肽 角膜上皮细胞

【摘要】：利用基因工程技术高效制备具有促进角膜上皮细胞增殖功能的垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP 27)衍生多肽RP2,在细胞水平初步研究其生物学作用,为其用于角膜损伤治疗提供实验基础。采用基因重组技术表达重组肽RP2,经Chitin-Beads和HPLC纯化、SDS-PAGE和质谱鉴定后,研究其对小鼠角膜上皮细胞增殖的影响。实验结果表明:利用基因重组技术制备的PACAP 27衍生多肽RP2的分子量为3.3 k Da,纯度达96%;分别用重组肽RP2、PACAP 27及PBS作用于小鼠角膜上皮细胞,处理24 h及48 h时,RP2处理组角膜上皮细胞增殖率分别为(49.6±3.1)%、(93.0±1.7)%,PACAP 27处理组细胞增殖率分别为(29.0±2.4)%、(78.8±2.6)%,PBS对照组细胞增殖率为(20.2±1.1)%,(40.9±3.3)%。利用建立的重组多肽制备技术条件,可实现PACAP衍生多肽RP2高效制备,制备的RP2可有效促进角膜上皮细胞的增殖,从而有望成为一种新型角膜损伤治疗候选药物。
【作者单位】： 暨南大学细胞生物学系;暨南大学生物医药研究院
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81373314) 广东省自然科学基金(S2012010008756) 高等学校博士学科点专项科研基金(20124401120012) 广东省高等学校科技创新项目(2012KJCX0015) 广东省教育部产学研结合项目(2010B090400544,2013B090500105) 广州市科技计划项目(2011J4300112)资助项目
【分类号】：R772.2
【正文快照】： 垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylatecyclase activating polypeptide,PACAP)是促胰液素/胰高血糖素/血管活性肽(VIP)家族中的一员,具有的较强的AC(腺苷酸环化酶)激活活性。主要以PACAP 38及PACAP 27(PACAP 38氨基末端1~27位aa序列)两种形式存在,并被证实来源于一个共

【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 徐文娜;马义;叶祖禄;罗天杰;饶磊;洪岸;;垂体腺苷酸环化酶激活肽衍生多肽RHMP的重组制备及促角膜损伤修复的初步研究[J];中国生物工程杂志;2013年02期

【共引文献】

相关期刊论文 前6条

1 韩宏杰;;重组人表皮生长因子修复角膜异物剔除后角膜创面的分析[J];国际眼科杂志;2013年11期

2 Adriano Guarnieri;Javier Moreno-Monta?és;Belén Alfonso-Bartolozzi;Alfonso L.Sabater;María García-Guzmán;Enrique J.Andreu;Felipe Prosper;;Quantification of corneal neovascularization after ex vivo limbal epithelial stem cell therapy[J];International Journal of Ophthalmology;2014年06期

3 UMEMOTO Terumasa;YAMATO Masayuki;NISHIDA Kohji;OKANO Teruo;;Regenerative medicine of cornea by cell sheet engineering using temperature-responsive culture surfaces[J];Chinese Science Bulletin;2013年35期

4 周庆军;谢立信;;组织工程角膜的基础研究和临床应用现状[J];中华细胞与干细胞杂志(电子版);2014年01期

5 Jinny J Yoon;Salim Ismail;Trevor Sherwin;;Limbal stem cells: Central concepts of corneal epithelial homeostasis[J];World Journal of Stem Cells;2014年04期

6 John D West;Natalie J Dorà;J Martin Collinson;;Evaluating alternative stem cell hypotheses for adult corneal epithelial maintenance[J];World Journal of Stem Cells;2015年02期

相关博士学位论文 前4条

1 李燕伟;人羊膜间充质干细胞移植对兔角膜碱烧伤的疗效及磁标记示踪分析[D];郑州大学;2013年

2 王贺;一种新的角膜缘干细胞缺乏动物模型及其发病机制研究[D];厦门大学;2014年

3 刁金美;基于脱细胞猪角膜基质的组织工程全层人角膜的体外重建、鉴定及其在动物移植中的作用研究[D];中国海洋大学;2014年

4 闫钧;antimiR-138修饰的rBMMSCs膜片的构建及其与种植体复合后的体内外生物学研究[D];第四军医大学;2014年

相关硕士学位论文 前7条

1 房传凯;兔角膜缘干细胞原代培养的研究[D];大连医科大学;2012年

2 王之发;基于细胞膜片技术复合富血小板纤维蛋白（PRF）构建可注射的组织工程骨的实验研究[D];第四军医大学;2013年

3 隋鲜鲜;甲壳素载体支架的生物相容性和对角膜上皮损伤的修复研究[D];中国海洋大学;2013年

4 孟凌志;诱导小鼠多能干细胞分化为角膜上皮细胞的实验研究[D];大连医科大学;2013年

5 刘彬;骨髓间充质干细胞膜片层的体外构建及成骨分化实验研究[D];遵义医学院;2014年

6 冯萧萧;皮下培植兔角膜缘干细胞联合新鲜羊膜移植治疗兔眼角膜缘干细胞缺乏性功能障碍的研究[D];昆明医科大学;2014年

7 董沐晨;炎症和高渗因素对角膜上皮干细胞活性的影响及其机制的体外研究[D];济南大学;2014年

【二级参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 马义;马民;洪爱华;洪岸;;重组PACAP衍生物RBAY-2的高效制备及二肽基肽酶对其酶解研究[J];药物生物技术;2009年05期

，

本文编号：1330593