5-氟尿嘧啶和顺铂缓释剂对横纹肌肉瘤RD细胞作用的研究

发布时间：2018-03-06 09:10

  本文选题：缓释剂　切入点：横纹肌肉瘤细胞　出处：《天津医科大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 目的： 将根据控释给药理论研制的5-氟尿嘧啶(5-Fu)和顺铂两种缓释剂进行体外释放实验及体外抑瘤实验,观察药物在体外的释放情况及对人横纹肌肉瘤RD细胞的抑制作用及其对细胞周期的影响,为缓释剂对眼眶横纹肌肉瘤作用的研究奠定基础。 方法： 1.5-Fu和顺铂缓释剂的体外释放实验：取含5mg 5-Fu的缓释剂置于10ml刻度试管中,加入5ml 0.1mol/LPBS,37℃恒温下浸泡,按浸泡后第1d,3d，，5d,8d留取浸出液标本,用高效液相色谱仪测定药物浓度,计算药物的释放量。顺铂缓释剂体外缓释方法同5-Fu(由于方法相同及经费考虑,顺铂缓释剂仅体外缓释留取浸出液标本,不再测定药物浓度)。 2.横纹肌肉瘤RD细胞的复苏及培养,观察细胞形态,了解生长情况和特性,并观察其与眼眶原发横纹肌肉瘤在形态学上的异同。 3.5-Fu和顺铂缓释剂的体外抑瘤实验：将5-Fu缓释剂浸泡后第1d,3d,5d,8d的浸出液标本,分别作用于横纹肌肉瘤RD细胞,并在作用24小时后观察横纹肌肉瘤RD细胞的形态变化,应用MTT比色法检测各浸出液标本对横纹肌肉瘤RD细胞增殖的抑制作用。顺铂缓释剂方法同5-Fu缓释剂。 4.应用流式细胞仪,分析不同浓度5-Fu和顺铂浸出液对横纹肌肉瘤RD细胞细胞周期的影响。 结果： 1.5-Fu的体外释放实验：第1、3、5、8d 5-Fu缓释剂在PBS中释放5-Fu的浓度分别为138.84μg/ml、42.08μg/ml、27.15μg/ml和22.33μg/ml。即第1、3、5、8d释放量分别为649.20μg、210.40μg、135.75μg、111.65μg,释放时间达8d以上。 2.复苏的横纹肌肉瘤RD细胞生长良好,传代稳定,细胞多呈梭形或蝌蚪形。与眼眶原发横纹肌肉瘤在形态学上基本一致。 3.5-Fu和顺铂缓释剂的体外抑瘤实验：5-Fu缓释剂第1、3、5、8d的浸出液对横纹肌肉瘤RD细胞的抑制率分别为57.6%、49.6%、44.8%、34.5%；顺铂缓释剂第1、3、5、8d的浸出液对横纹肌肉瘤RD细胞的抑制率分别为87.8%、46.4%、42.5%、31.1%。,MTT法所测5-Fu和顺铂缓释剂的OD值均低于正常对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。空白缓释剂对横纹肌肉瘤RD细胞无明显抑制作用,与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。 4.流式细胞仪检测结果显示,两种缓释剂作用后的横纹肌肉瘤RD细胞主要表现为G1期阻滞,S,G2期细胞减少,PI%与对照组相比差异有显著性(P0.05)。 结论： 1.5-Fu和顺铂缓释剂能在8d内在体外先突释、后缓释,较稳定地持续释放,并对人横纹肌肉瘤RD细胞有持续地抑制作用,干扰了RD细胞的细胞周期,产生G1期阻滞,从而抑制细胞增殖。5-Fu对RD细胞的抑制作用具有剂量依赖性。 2.根据本实验的结果,推断5-Fu和顺铂缓释剂同样可对眼眶原发横纹肌肉瘤细胞有持续地抑制作用,为后续研究提供实验基础及理论依据。
[Abstract]:Objective:
According to the theory of development of controlled-release drug delivery 5- fluorouracil and cisplatin (5-Fu) two release agent for in vitro release experiments and in vitro antitumor experiments, observation of drug release in vitro and inhibition of human rhabdomyosarcoma RD cells and its effects on cell cycle, lay the foundation for sustained release agent on effect of orbital rhabdomyosarcoma.
Method锛

本文编号：1574206