下颌前移矫治对OSAHS兔血浆NO及肺小动脉的影响
发布时间：2018-04-16 11:42
本文选题：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 + 动物模型 ； 参考：《河北医科大学》2011年硕士论文
【摘要】：目的:通过建立阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome, OSAHS)新西兰兔模型,研究OSAHS对兔血浆NO(nitric oxide, NO)及肺小动脉的影响,探讨下颌前移矫治器(Mandibular advancement device, MAD)治疗OSAHS后二者的改变,为临床治疗OSAHS及预防其可能引发的肺小动脉改变提供实验基础和理论依据。 方法:将30只雄性6月龄体重3~3.5kg新西兰兔随机分为三组,分别为OSAHS组、MAD组和对照组。OSAHS组和MAD组实验动物均行1%戊巴比妥钠全身麻醉。于软腭中间距软硬腭交界0.5cm处,粘膜下肌层注射聚丙烯酰胺水凝胶1~2ml,直至动物出现响亮鼾声及呼吸暂停时停止。仰卧位头颅侧位片显示注射后软腭后缘1/4点1/2点3/4点处上气道宽度较对照组明显狭窄,动脉血气分析发现注射后动物睡眠发生呼吸暂停时血氧饱和度较对照组降低了22%。以上说明OSAHS动物模型建立成功。MAD组配带下颌前移矫治器引导下颌向前。 MAD组佩戴矫治器两天后,三组动物以5~6ml/kg的剂量经口灌注10%水合氯醛催眠动物,使之仰卧位睡眠,4~6小时/天,持续8周。首次睡眠过程中分别对三组动物上气道间隙再次进行测量。同时,在睡眠呼吸暂停发生时分别抽取三组动物的耳缘动脉血1ml进行血氧饱和度氧分压二氧化碳分压和pH值测定。 8周后,1%戊巴比妥钠麻醉状态下自耳缘静脉取血2ml ,肝素抗凝,立即离心10分钟(4℃, 3000r/min),分离并收集血浆,用硝酸还原酶法测量血浆中NO的含量。 在同一麻醉状态下,开胸取出肺组织后3. 3 mol/L中性甲醛缓冲液灌注固定肺组织10分钟,结扎气管后放于同种固定液中48小时以上。沿肺门水平横断取材,梯度酒精顺序脱水,二甲苯透明后石蜡包埋,切片,HE常规染色及EVG(Elastic Van Gieson, EVG)弹力纤维染色,Nikon ECLIPSE 80i显微镜观察肺小动脉(直径≤150μm)的变化,应用Motic Digilab version1.2自动图像分析系统对肌性肺动脉相对中膜厚度(percentage wall thickness, WT%)及肺微动脉百分比进行测定。同时,取下腭咽部凝胶注射部位组织,固定于中性甲醛缓冲液中,常规石蜡包埋、切片,HE染色,观察其组织学结构。 实验数据应用SPSS13.0统计软件分别进行统计分析,以α0.05作为显著性检验水准。 结果: 1一般情况:OSAHS组鼾声响亮,不均匀,睡眠过程中伴数次惊醒及肢体症状; MAD组呼吸声音稍粗重,较平稳;正常组睡眠过程中呼吸均匀、平稳、有规律。 2仰卧位上气道宽度分析:OSAHS组软腭1/4点1/2点和3/4点的上气道间隙分别为2.66±1.04mm、2.26±0.79mm、2.29±0.73mm,明显小于MAD组和对照组,有显著性差异(P0.05);而MAD组较对照组减小但无统计学意义(P0.05)。 3血气分析:OSAHS组血氧饱和度动脉氧分压和pH值分别为69.43±1.66%、72.40±2.53mmHg、7.25±0.13,较MAD组、对照组显著降低,差别有统计学意义(P0.05)。二氧化碳分压为53.32±2.57 mmHg,明显高于MAD组、对照组,差别有显著性(P0.05)。MAD组和对照组以上各项均无显著性差异(P0.05)。 4注射部位组织学观察:大体观察软腭中间后缘处有白色隆起,外有一层薄而透明的包膜包裹,界限清楚,质地较韧且富有弹性。光镜下观察凝胶被染成蓝紫色,成交联状,表面有一层由弹性纤维和胶原纤维形成的膜包绕,与周围组织界限清楚,没有炎症反应及向周围组织扩散的现象。 5血浆中NO的测定:OSAHS组、MAD组及对照组的NO含量分别为52.28±0.38μmol/L、65.16±0.53μmol/L、66.17±0.60μmol/L。OSAHS组NO含量明显低于MAD组和对照组,有统计学意义(P0.05);MAD组低于对照组,但无统计学意义(P0.05)。 6肺小动脉组织学观察: 6.1肌性肺动脉(40μm≤d≤150μm)的组织学观察:HE染色镜下观察OSAHS组管壁增厚,管腔狭窄,呈现肺血管重建的现象;MAD组动脉管壁轻微增厚;对照组肌性肺动脉管壁较薄,管腔较大。EVG弹力纤维染色镜下观察发现OSAHS组中膜明显增厚;MAD组中膜略有增厚,但与对照组相比变化并不明显;对照组中膜很薄。 6.2肺微动脉(d≤40μm)的组织学观察:HE染色较难辨别三组间差别。EVG弹力纤维染色镜下观察发现OSAHS组出现较多的肌性动脉,即肺微动脉有内外两层弹力膜,其间有平滑肌细胞环绕;MAD组大部分肺微动脉仅有一层弹力膜包绕,类似于对照组。 7肌性肺动脉相对中膜厚度的测定:OSAHS组、MAD组及对照组的WT%分别为13.07±0.56%、9.05±0.36%、8.62±0.46%。OSAHS组WT%显著高于MAD组及对照组,有统计学差异(P0.05);MAD组WT%较对照组略有增大,但无统计学差异(P0.05)。 8肺微动脉百分比的测定: OSAHS组、MAD组及对照组肌性动脉和部分肌性动脉占肺微动脉的百分比分别为22.56%、8.75%、7.64%。OSAHS组明显高于MAD组及对照组,有统计学差异(P0.05);MAD组及对照组间无统计学差异(P0.05)。 结论:OSAHS可引起兔血浆NO及肺小动脉结构的改变,MAD对OSAHS引起的肺血管结构改变具有预防作用。
[Abstract]:Objective : To study the effect of obstructive sleep apnea - syndrome ( Obstructive sleep apnea - syndrome ) New Zealand rabbits model on nitric oxide ( NO ) and pulmonary arterioles in rabbits .
Methods : 30 male 6 - month - old New Zealand rabbits were randomly divided into three groups , the group of obstructive sleep apnea - palate was 1 - 2 ml in the soft palate , and 1 - 2 ml of polyacrylamide hydrogel was injected into the submucous membrane until the animal appeared loud snoring and apnea .
After two days in MAD group , three groups of animals were perfused with 10 % water chloral hypnotic animal at a dose of 5 - 6 ml / kg for 8 weeks . The air gap of three groups of animals was measured again during the first sleep . At the same time , the blood oxygen saturation , oxygen partial pressure , carbon dioxide partial pressure and pH value were measured in 1 ml of blood oxygen saturation of three groups of animals during the first sleep .
After 8 weeks , 2 ml of blood were collected from the auricular vein in 1 % sodium opental anesthesia . The heparin anticoagulant was centrifuged immediately for 10 minutes ( 4 鈩，
本文编号：1758777
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