LMPs特异性T淋巴细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用
本文选题:EB病毒 + 潜伏膜蛋白 ; 参考:《南京医科大学学报(自然科学版)》2014年06期
【摘要】:目的:研究树突状细胞负载EB病毒潜伏膜蛋白(latent membrane proteins,LMPs)介导生成的LMPs特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)LMPs-CTL的生物学特性,观察其对LMPs阳性鼻咽癌细胞SUNE的杀伤作用。方法:用淋巴细胞分离液分离人外周血单核细胞,采用贴壁分离及白细胞介素(interleukin,IL)-4、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)等细胞因子诱导成熟树突状细胞(dendritic cell,DC),通过DC细胞负载LMPs多肽抗原并递呈给同源T淋巴细胞,制备LMPs-CTL。CCK8法检测LMPs-CTL对SUNE细胞的杀伤作用;ELISA和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(carboxy fluoroscein succinimidyl ester,CFSE)染色法检测LMPs-CTL分泌IFN-γ及其增殖。结果:LMPsCTL对SUNE细胞的杀伤率在12 h和24 h分别为(43.47±1.93)%和(77.15±3.18)%,显著高于对照组的(11.45±3.06)%和(24.27±13.20)%(P0.05)。SUNE细胞刺激后,LMPs-CTL增殖能力较对照组有明显增强,IFN-γ分泌量达到(613.40±121.77)pg/ml,显著高于对照组(86.90±3.70)pg/ml(P0.05)。结论:通过DC细胞负载LMPs混合多肽可诱导生成LMPsCTL,对LMPs阳性鼻咽癌细胞有较强的杀伤作用。
[Abstract]:Aim: to study the biological characteristics of cytotoxic T lymphocytes (LMPs) mediated by EBV latent membrane protein (LMPs) mediated by dendritic cells loaded with EB virus latent membrane protein (EBV), and to observe its killing effect on LMPs positive nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line SUNE. Methods: human peripheral blood mononuclear cells were isolated from human peripheral blood by lymphocyte isolation. Mature dendritic cells were induced by adherent isolation, interleukin-IL-4, granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and other cytokines. The dendritic cells were loaded with LMPs polypeptide antigen and presented to homologous T lymphocytes through DC cells. The cytotoxic effect of LMPs-CTL on SUNE cells was detected by LMPs-CTL.CCK8 method. LMPs-CTL secreted IFN- 纬 and its proliferation were detected by Elisa and carboxy fluoroscein succinimidyl ester-CFSE staining of hydroxy fluorescein diacetate succinimide. Results the killing rate of SUNE cells at 12 h and 24 h were 43.47 卤1.93% and 77.15 卤3.18%, respectively, which were significantly higher than those of the control group (11.45 卤3.06g% and 24.27 卤13.20)%(P0.05).SUNE cells), and the proliferative capacity of LMPs-CTL was 613.40 卤121.77 ng / ml, which was significantly higher than that of the control group (86.90 卤3.70g / ml). Conclusion: DC cells loaded with LMPs mixed polypeptides can induce the formation of LMPsCTL, which has a strong killing effect on LMPs positive nasopharyngeal carcinoma cells.
【作者单位】: 南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室;南京军区军事医学研究所;
【基金】:江苏省临床医学科技专项(BL2013038) 江苏省普通高校研究生科研创新计划(CXZZ12_0563)
【分类号】:R739.63
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,本文编号:1830071
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