鸦胆子油乳对Hep-2细胞增殖抑制及凋亡诱导作用的研究
本文选题:鸦胆子油乳注射液 + 喉癌Hep-2细胞 ; 参考:《宁夏医科大学》2013年硕士论文
【摘要】:目的探讨鸦胆子油乳注射液对喉癌Hep-2细胞的抑制作用及机制。方法利用MTT比色法检测五个不同药物浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8g/L)对细胞的抑制率;采用倒置显微镜观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测凋亡基因Bcl-2、Bax的表达。结果MTT显示鸦胆子油乳对Hep-2细胞的生长抑制作用呈剂量和时间依赖性。倒置显微镜下可见细胞凋亡的形态学改变,,显示加药组细胞染色体固缩,聚集呈块状、新月状,出现凋亡小体。流式细胞仪检测显示0.2、0.4、0.6g/L药物作用48h后凋亡率分别为(42.58±4.36)㳠、(57.71±3.07)㳠和(75.50±3.93)㳠,显著高于对照组(0.96±0.17)㳠,差异有统计学意义(F=8.82,P0.01);实时荧光定量PCR结果显示随着鸦胆子油乳注射液的浓度增加,Bcl-2mRNA的表达减少,BaxmRNA的表达量逐渐上升,与对照组存在统计学差异(P0.01)。结论鸦胆子油乳诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡是通过凋亡机制,下调Bcl-2mRNA和上调BaxmRNA的表达量来促进肿瘤细胞凋亡,作用呈剂量和时间依赖性。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect and mechanism of Brucea javanica oil emulsion injection on laryngeal carcinoma Hep-2 cells. Methods MTT colorimetric assay was used to detect the inhibitory rate of five different drug concentrations (0.1 ~ 0.22 ~ 0.4 ~ 0.6g / L) on cells. The morphologic changes of cells were observed by inverted microscope, apoptosis rate was detected by flow cytometry, and the expression of apoptotic gene Bcl-2O _ (Bax) was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results MTT showed that Brucea javanica oil emulsion inhibited the growth of Hep-2 cells in a dose and time dependent manner. The morphological changes of apoptosis were observed under inverted microscope, which showed that the cells in the admixture group showed pyknosis, aggregation, crescent shape and apoptotic bodies. Flow cytometry analysis showed that the apoptotic rate was (42.58 卤4.36)%, (57.71 卤3.07), respectively, 48 h after treatment with 0.2G / L 0.4g / L drug. (75.50 卤3.93) and (75.50 卤3.93), which were significantly higher than those in the control group (0.96 卤0.17), the difference was statistically significant (F _ (8.82) P _ (0.01), the results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Bcl-2 mRNA decreased gradually with the increase of the concentration of Brucea javanica oil emulsion injection, and there was a statistical difference between the two groups (P0.01). Conclusion Brucea javanica oil emulsion induces apoptosis of human laryngeal carcinoma Hep-2 cells through the mechanism of apoptosis, down-regulating Bcl-2 mRNA and up-regulating the expression of Bax mRNA, in a dose-and time-dependent manner.
【学位授予单位】:宁夏医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R739.65
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本文编号:2066227
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