携带绿色荧光报告基因的EBV-LMP1真核表达载体构建与鼻咽癌细胞中的表达

发布时间：2018-07-04 13:48

  本文选题：EBV潜伏膜蛋白(EBV-LMP) + c　； 参考：《基因组学与应用生物学》2015年06期

【摘要】：潜伏膜蛋白1(LMP1)是由EB病毒编码的致瘤蛋白,众多研究表明LMP1蛋白可通过NF-κB、p38 MAPK、c-JNK等多条重要信号通路引起鼻咽癌细胞的生物学行为改变。我们从EB病毒阳性的B95-8狨猴淋巴瘤细胞中克隆EB病毒LMP1 c DNA,构建携带绿色荧光基因的真核表达质粒p IRES2-Zs-Green1-LMP1,通过脂质体转染的方法将质粒导入鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2中,利用质粒所携带的绿色荧光蛋白表达粗略计算转染的效率,通过免疫细胞化学(ICC)、RT-PCR、Western-Blot检测该质粒的表达。本实验室所构建的p IRES2-Zs-Green1-LMP1表达质粒能在鼻咽癌细胞内表达LMP1蛋白,为后续的实验研究奠定基础。
[Abstract]:Latent membrane protein 1 (LMP1) is a tumorigenic protein encoded by Epstein-Barr virus (EBV). Many studies have shown that LMP1 protein can cause biological behavior changes in nasopharyngeal carcinoma cells through several important signal pathways, such as NF- 魏 Bmp38 MAPKCnc-JNK. Epstein-Barr virus LMP1 c DNA was cloned from EBV-positive B95-8 marmoset lymphoma cells, and the eukaryotic expression plasmid pIRES2-Zs-Green1-LMP1 was constructed. The plasmid was transfected into nasopharyngeal carcinoma cell line CNE _ 1 and CNE _ 2 by liposome transfection. The efficiency of transfection was roughly calculated by using the expression of green fluorescent protein carried by the plasmid. The expression of the plasmid was detected by immunocytochemistry (ICC) RT-PCRN Western-Blot. The expression plasmid of pIRES2-Zs-Green1-LMP1 can express LMP1 protein in nasopharyngeal carcinoma cells.
【作者单位】： 广西医科大学医学科学实验中心;广西医科大学生物化学与分子生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金(No.81260405) 广西自然科学基金(No.2011GXNSFA018233) 广西区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室基金项目(GK2013-A-02-02)共同资助
【分类号】：R739.63

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2096272