P物质在真菌性角膜溃疡中的表达及意义

发布时间：2018-07-23 10:45

【摘要】： 目的检测大鼠真菌性角膜溃疡和细菌性角膜溃疡中SP的表达变化过程及差异,探讨SP在真菌性角膜溃疡发病过程中的作用。 方法55只Wistar大鼠随机分为空白对照组(A),实验一组(B),实验二组(C),右眼为实验眼,左眼为对照眼。A组5只大鼠不做任何处理；B组为真菌性角膜溃疡组25只,接种镰刀菌；C组为细菌性角膜溃疡组25只,接种金黄色葡萄球菌；对照眼以生理盐水代替菌株。每日裂隙灯观察眼表情况,并刮取B组、C组溃疡边缘及底部组织涂片行革兰染色和10%氢氧化钾涂片,同时将刮取物接种于沙保弱培养基上25℃培养以确定真菌或细菌感染。详细记录各组大鼠角膜溃疡生长情况。分别于造模后1d、5d、8d、10d、14d随机抽取各组大鼠取材。HE染色观察角膜溃疡组织学变化。免疫组织化学方法和RT-PCR法检测SP的表达。 结果1、B组1d形成灰白色溃疡灶,可见免疫环；5d为溃疡高峰期,可出现穿孔；8d时溃疡缩小；10d有新生血管生长,14d形成血管化角膜白斑。C组变化与B组时间变化类似,但C组充血更严重,无免疫环。对照眼1d角膜水肿,5d角膜透明,未见感染。 2、HE染色示B组1d溃疡形成,基质浅层胶原纤维排列紊乱,中性粒细胞浸润。5d溃疡加重,整个基质层大量炎性细胞浸润；8d溃疡缩小,基质炎症细胞减少,成纤维细胞增生,见新生血管形成；10d新生血管成熟；14d基质层纤维呈瘢痕样重构。C组变化类似,炎细胞浸润较多。 3、免疫组化示：(1)正常角膜上皮细胞中中等量表达SP,基质层及内皮有微弱表达(2)B组中角膜内皮细胞、炎症细胞、新形成的血管内皮细胞,成纤维母细胞中SP表达均增强,8d最强,10d下降,14d降至低于正常,差异有统计学意义(P0.05)(3)C组其变化趋势与B组中类似,但相同时间点两组间比较,B组低于C组,差异有统计学意义(P0.05)(4)对照眼1d达到最高,5d降至正常水平。各时间点B组,C组实验眼与对照眼之间比较差异有统计学意义(P0.05)。 4、RT-PCR与免疫组织化学检测的变化趋势一致。结论真菌性角膜溃疡中SP表达早期与溃疡进展一致,晚期与溃疡修复一致,提示SP可能参与了真菌性角膜溃疡早期损伤和晚期修复过程；其表达低于同时间点的细菌性角膜溃疡,提示其表达水平较低可能参与了真菌性角膜溃疡疼痛较轻的机制。
[Abstract]:Objective to detect the expression of SP in fungal corneal ulcer and bacterial corneal ulcer in rats and to explore the role of SP in the pathogenesis of fungal corneal ulcer. Methods Fifty-five Wistar rats were randomly divided into control group (group B), experimental group 2 (group C), right eye (group C) and control group (group A) (n = 5). 25 rats in group B were inoculated with Fusarium in group B without any treatment. Group C was inoculated with Staphylococcus aureus in 25 rats of bacterial corneal ulcer group, and the control group was replaced by normal saline. Slit-lamp was used to observe the surface of the eye. Gram staining and 10% potassium hydroxide smear were performed on the edge and bottom tissue of ulcers in group B and C, and the scrape was inoculated at 25 鈩，

本文编号：2139144