联合应用以Hif-1α和Survivin基因为靶标的siRNA对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和周期的影响

发布时间：2018-08-05 11:53

【摘要】：目的:研究联合转染以乏氧诱导因子-1α(Hif-1α)和Survivin基因为靶标的siRNA后,鼻咽癌CNE-2细胞增殖和周期的改变。方法:以Hif-1α和Survivin基因为靶标的siRNA共同转染鼻咽癌CNE-2细胞,以单靶点siRNA转染组和未处理组为对照。MTT检测转染后细胞的增殖活力;流式细胞仪检测转染后细胞的周期变化,RT-PCR与Western Blot技术检测转染后各组细胞相应靶基因mRNA及相关蛋白表达水平的变化。结果:鼻咽癌CNE-2细胞分别转染以Hif-1α和Survivin基因为靶标的siRNA后,细胞的增殖能力明显下降,相应靶基因的mRNA及蛋白的表达明显减低,细胞周期出现G0/G1期阻滞;联合转染两种siRNA后细胞的各项检测结果均明显强于对照组,与各组相比差异均有统计学意义(P0.01)。结论:联合以Hif-1α和Survivin基因为靶标的siRNA干扰组,可以较单基因干扰组更有效干扰鼻咽癌CNE-2细胞内靶基因mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖。
[Abstract]:Aim: to study the changes of proliferation and cycle of nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cells after co-transfection of siRNA targeting hypoxia inducible factor 1 伪 (Hif-1 伪) and Survivin. Methods: nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cells were co-transfected with siRNA targeting Hif-1 伪 and Survivin, and the proliferation activity of transfected CNE-2 cells was detected by single target siRNA transfection group and untreated group. Flow cytometry was used to detect the cell cycle changes after transfection. RT-PCR and Western Blot techniques were used to detect the expression level of target gene mRNA and related proteins. Results: after transfection of CNE-2 cells with Hif-1 伪 and Survivin as target siRNA, the proliferative ability of the cells decreased significantly, the expression of mRNA and protein of the corresponding target genes decreased significantly, and the cell cycle was blocked in G0/G1 phase. After co-transfection of two kinds of siRNA, the results of cell detection were significantly stronger than that of control group, and the difference was statistically significant compared with each group (P0.01). Conclusion: the siRNA interference group with Hif-1 伪 and Survivin as the target can interfere the expression of target gene mRNA and protein and inhibit the proliferation of NPC CNE-2 cells more effectively than the single gene interference group.
【作者单位】： 昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心;四川省人民医院城东病区耳鼻咽喉科;
【基金】：2012年国家自然科学基金地区项目(No:81260312) 2011年云南省卫生科技内设研究机构项目资助(No:2011WS0068) 云南省社会发展科技计划(应用基础研究重点项目)(No:2009CC026)
【分类号】：R739.63

【参考文献】

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【共引文献】

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7 张e，

本文编号：2165719