靶向喉癌的蜂毒肽重组抗体的构建及鉴定

发布时间：2018-08-05 17:37

【摘要】：利用大肠杆菌表达系统制备了重组融合蛋白antiEGFR/MEL,并用Ni2+层析柱对其进行了纯化.该重组蛋白中抗表皮生长因子受体(antiEGFR)单链抗体(scFv)主要靶向喉癌细胞中的EGFR,而蜂毒肽(MEL)主要抑制肿瘤细胞增殖.采用SDS-PAGE和Westernblot检测证明了antiEGFR/MEL的有效表达.共聚焦显微镜和流式细胞术实验结果表明,antiEGFR/MEL可与Hep-2肿瘤细胞有效结合,而几乎不与EGFR阴性的Jurkat细胞结合.噻唑蓝(MTT)检测结果说明,antiEGFR/MEL可有效抑制人喉癌细胞Hep-2的增殖.以上结果表明,antiEGFR/MEL能够有效靶向EGFR阳性肿瘤细胞,并有效抑制肿瘤细胞增殖,有望应用于EGFR靶向肿瘤治疗.
[Abstract]:The recombinant fusion protein antiEGFR/MEL was prepared by the Escherichia coli expression system and purified by Ni2+ chromatography column. The anti epidermal growth factor receptor (antiEGFR) single chain antibody (scFv) was mainly targeted to the EGFR in the larynx cells, and MEL was used to inhibit the proliferation of the tumor cells. SDS-PAGE and Westernblot were used to detect the proliferation of the tumor cells. The effective expression of antiEGFR/MEL was demonstrated. The results of confocal microscopy and flow cytometry showed that antiEGFR/MEL could be effectively combined with Hep-2 tumor cells, but almost not combined with EGFR negative Jurkat cells. The results of thiazolium blue (MTT) showed that antiEGFR/MEL could effectively inhibit the proliferation of Hep-2 in human larynx cells. The above results showed that AntiEGFR/MEL can effectively target EGFR-positive tumor cells and inhibit the proliferation of tumor cells.
【作者单位】： 吉林省肿瘤医院头颈外一科;吉林大学第二临床医院耳鼻咽喉科;吉林大学动物医学学院;吉林大学中日联谊医院超声科;日照市东港区人民医院;
【基金】：国家自然科学基金(批准号:81101140) 国家“八六三”计划项目(批准号:2012AA02A407) 吉林省科技发展计划重点项目(批准号:20130206041NY)资助~~
【分类号】：R739.65

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2166506