波动的压力对兔角膜内皮细胞的影响

发布时间：2018-08-15 19:27

【摘要】：目的观察波动的压力对角膜内皮细胞的影响。方法将体外培养的第一代兔角膜内皮细胞分为两组:A组为压力波动组(压力设置为:15 mm Hg~25 mm Hg~20 mm Hg~10 mm Hg,每个压力持续6 h;1 kPa=7.5 mm Hg);B组为30 mm Hg压力组;C组为无压力组。三组细胞分别培养24 h。免疫细胞化学染色法鉴定原代角膜内皮细胞形态;台盼蓝-茜素红联合染色检测细胞活性,HE染色观察细胞形态;Western-blotting检测细胞中Bcl-2和P53蛋白的表达水平。结果获取的所有细胞证实为角膜内皮细胞表型,无角膜上皮细胞及基质细胞污染。三组细胞分别培养24 h后,经台盼蓝-茜素红染色和HE染色证实:两个压力培养组的细胞活性较无压力培养组明显下降,其中压力波动组的细胞活性低于30 mm Hg压力组。同时无压力组、30 mm Hg压力组和压力波动组细胞中P53蛋白的相对表达量分别为0.150±0.005、0.253±0.014、0.670±0.019,差异有统计学意义(P0.05)。结论证实了高压力及非生理性波动的压力对角膜内皮细胞均具有损伤作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of fluctuating pressure on corneal endothelial cells. Methods the first generation rabbit corneal endothelial cells cultured in vitro were divided into two groups: pressure fluctuation group (pressure: 15 mm Hg~25 Hg~20 mm Hg~10 mm Hg), 30 mm Hg pressure group (30 mm Hg pressure group) and 30 mm Hg pressure group (30 mm Hg pressure group). Three groups of cells were cultured for 24 h. The morphology of primary corneal endothelial cells was identified by immunocytochemical staining and the expression of Bcl-2 and p53 protein was detected by Western blotting. Results all the obtained cells were confirmed as corneal endothelial cell phenotype, no corneal epithelial cells and stromal cells were contaminated. After 24 h culture, trypan blue alizarin red staining and HE staining showed that the cell activity of the two pressure culture groups was significantly lower than that of the pressure free culture group, and the cell activity of the pressure fluctuating group was lower than that of the 30 mm Hg pressure group. At the same time, the relative expression of p53 protein in 30 mm Hg pressure group and pressure fluctuating group was 0.150 卤0.005 卤0.253 卤0.014 0.70 卤0.019 respectively, the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion it is confirmed that high pressure and non-physiological fluctuation of pressure can injure corneal endothelial cells.
【作者单位】： 南昌爱尔眼科;江西新视界眼科医院 南昌大学;中山大学中山眼科中心;
【基金】：国家自然科学基金资助(编号:30801263)~~
【分类号】：R772.2

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