趋化因子受体CXCR4小干扰RNA对人喉癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

发布时间：2018-12-16 11:34

【摘要】： 目的:探讨趋化因子受体CXCR4小干扰RNA(siRNA)对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)在裸鼠体形成的移植瘤淋巴结微转移的影响,以寻找人喉癌基因治疗的有效途径。方法:将与CXCR4 mRNA互补的小干扰RNA(siRNA)通过阳离子脂质体转染人喉癌细胞株Hep-2,用逆转录-聚合酶连反应(RT-PCR)检测转染后Hep细胞CXCR4 mRNA表达情况。雄性裸小鼠10只,随机分成2组,即Hep-2组和siRNA转染组,建立人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型,建模成功后观察裸鼠的一般情况,每3d用游标卡尺测量皮下肿块大小,按照公式V=1/2ab2计算肿块体积(a:肿块长径,b:肿块短径),绘制裸鼠生长曲线,计算肿瘤抑制率。喂养6wK后处死裸鼠,处死裸鼠后测量移植瘤体积并计数淋巴结转移情况;采用苏木精-伊红染色病理证实移植瘤及淋巴结转移,免疫组织化学SP法检测各组皮下移植瘤CXCR4蛋白的表达情况。结果:人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型建立成功后,siRNA转染组裸鼠皮下移植瘤的体积增长明显滞后于Hep-2组,差异有统计学意义(P0.05)。免疫组织化学显示isRNA转染组CXCR4蛋白表达明细减少。结论:siRNA能在体内明细抑制喉癌CXCR4基因的表达,进而抑制喉癌实体瘤增殖和生长。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of chemokine receptor CXCR4 small interfering RNA (siRNA) on the micrometastasis of human laryngeal carcinoma cell line (Hep-2) in nude mice and to find an effective approach to gene therapy of human laryngeal carcinoma. Methods: the expression of CXCR4 mRNA in human laryngeal carcinoma cell line Hep-2, was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) after transfection of small interfering RNA (siRNA) complementary to CXCR4 mRNA by cationic liposome. Ten male nude mice were randomly divided into two groups: Hep-2 group and siRNA transfection group. The subcutaneous transplanted tumor model of human laryngeal carcinoma was established in nude mice. The general condition of nude mice was observed after modeling successfully. The size of subcutaneous tumor was measured by Vernier caliper every 3 days. The tumor volume (a: tumor long diameter, b: mass short diameter) was calculated according to the formula V=1/2ab2, the growth curve of nude mice was drawn, and the tumor inhibition rate was calculated. After feeding with 6wK, nude mice were killed, the volume of transplanted tumor was measured and lymph node metastasis was counted. Hematoxylin-eosin staining was used to confirm the metastasis of transplanted tumor and lymph node. The expression of CXCR4 protein in subcutaneous transplanted tumor was detected by immunohistochemical SP method. Results: after the establishment of subcutaneous transplanted tumor model of human laryngeal carcinoma in nude mice, the volume growth of subcutaneous transplanted tumor in siRNA transfection group was significantly slower than that in Hep-2 group (P0.05). Immunohistochemistry showed that the expression of CXCR4 protein decreased in isRNA transfection group. Conclusion: siRNA can inhibit the expression of CXCR4 gene in laryngeal carcinoma and then inhibit the proliferation and growth of laryngeal carcinoma solid tumor.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R739.65

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本文编号：2382266