可溶性CD40L促进甲状腺相关性眼病患者眼眶成纤维细胞增殖和透明质酸合成酶表达

发布时间：2019-03-20 13:31

【摘要】：目的探讨可溶性CD40L(sCD40L)对甲状腺相关性眼病(TAO)患者眼眶成纤维细胞(OFs)增殖和3种透明质酸合成酶(HAS)mRNA表达水平的影响,初步探讨sCD40L在TAO发病中的作用。方法取5例TAO患者和3例正常对照标本原代培养OFs,采用MTS比色法检测终质量浓度6.25、12.5、25、50、100、200ng/mL的sCD40L作用48h后对不同来源OFs增殖的影响;实时荧光定量PCR技术检测终质量浓度12.5、25、50、100ng/mL及作用3、6、12、24h后的sCD40L对不同来源OFs的3种HAS基因(HAS1~3)表达水平的影响。结果 25ng/mL及以上浓度的sCD40L作用48h后对TAO患者OFs有促增殖作用(P0.05);而50ng/mL及以上浓度的sCD40L作用48h后才能对正常对照OFs有促增殖作用(P0.05),且作用较弱。TAO患者OFs中HAS3mRNA的合成在sCD40L的刺激下增加,并且呈现出浓度和时间依赖的趋势。结论 sCD40L能够促进TAO患者OFs的生长以及HAS3基因的表达,提示sCD40L在TAO的病理过程中起一定作用。
[Abstract]:Aim to investigate the effects of soluble CD40L (sCD40L) on the proliferation of (OFs) and the expression of three hyaluronic acid synthetase (HAS) mRNA in orbital fibroblasts of patients with thyroid-associated ophthalmopathy (TAO), and to explore the role of sCD40L in the pathogenesis of TAO. Methods OFs, was cultured from 5 TAO patients and 3 normal controls. The effects of sCD40L on the proliferation of OFs from different sources were detected by MTS colorimetric assay after 48 h treatment with sCD40L of 6.25,12.5,25,50100200 ng / mL. Real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect the effects of the final concentrations of 12.5, 25,50100 ng / mL and 3,6,12,24 hours after sCD40L on the expression of three HAS genes (HAS1~3) from different sources of OFs. Results after 48 h of treatment with 25ng/mL and above concentration of sCD40L, the proliferation of OFs in TAO patients was promoted (P0.05). However, sCD40L at or above the concentration of 50ng/mL could promote the proliferation of normal control OFs after 48 h (P0.05), and the effect was weak. The synthesis of HAS3mRNA in OFs of TAO patients increased under sCD40L stimulation, and showed a concentration-and time-dependent trend. Conclusion sCD40L can promote the growth of OFs and the expression of HAS3 gene in patients with TAO, suggesting that sCD40L may play a role in the pathological process of TAO.
【作者单位】： 第二军医大学长征医院眼科;
【基金】：国家自然科学基金(81371056)~~
【分类号】：R581.1;R771.3

【参考文献】

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本文编号：2444262