慢性高眼压大鼠视网膜形态学及Brn-3a表达变化

发布时间：2019-10-10 09:25

【摘要】：目的 观察慢性高眼压大鼠不同时期的眼压、视网膜形态学及Brn-3a的表达变化。 方法 (1)SD雌性大鼠35只,随机分为正常对照组、模型组,大鼠左眼为模型眼,右眼为对照眼,采用Shareef-Sharma模型,烙闭大鼠左眼3支上巩膜静脉,建立慢性高眼压大鼠动物模型,分别于术前、术后30min、术后1d,3d,7d, 14d,28d,测量双眼眼压。 (2)分别于造模后1d、3d、5d、7d、14d、28d随机过量麻醉处死,每组5只,正常对照组5只,行3点钟位缝线标记,立即摘除大鼠眼球,浸泡于4%多聚甲醛的固定液中。48 h后沿角巩膜缘切除眼前节,剥离晶状体,余下部分逐节脱水、透明、石蜡包埋,做4μm厚切片,烘干备用,做视网膜石蜡切片,常规苏木素-伊红染色镜下观察视网膜各层组织学改变,甲苯胺蓝染色计数视网膜神经节细胞(RGCs),用免疫组织化学法检测各个时间段Brn-3a的表达情况。 结果 35只大鼠(35眼)术前的基线眼压是(13.61±1.60)mmHg, 4W时的眼压几乎是正常眼压的1.59倍,且在4W内眼压维持稳定。光镜下正常大鼠的视网膜从内向外依次为神经节细胞层(GCL)、内核层(INL)、感光细胞层(ONL)。GCL的细胞呈单层排列,较为整齐,胞核清楚数目相对较少,INL和ONL呈多层排列,且细胞排列紧密,数目相对较多。造模鼠眼视细胞内外节断裂,RGCs层明显空泡变且排列稀疏、细胞体积大小不一,核仁不清或无,核内染色质稀少且分布不均,神经纤维层水肿。RGCs计数,正常对照组(n=5)RGCs是29.08±1.98(个/高倍视野),模型组与正常对照组相比,除1d组外均有统计学意义(p0.05)。RGCs层Brn-3a蛋白表达阳性的细胞在细胞核着色,与正常对照组相比,各模型组Brn-3a蛋白表达差异均有显著意义(p0.01)。 结论 采用Shareef-Sharma模型成功地建立大鼠慢性高眼压动物模型,其眼压中等程度升高;模型组中RGCs的丢失与高眼压持续的时间存在高度相关性,高眼压时间越长,RGCs的丢失越多;Brn-3a~+细胞仅存在于视网膜的GCL,Brn-3a的表达随着时间的推移、RGCs的凋亡而逐渐减少。
【图文】：

图 1 实验期间双眼眼压值比较Fig1 Comparison of IOP of Oculus Uterque during the experiment

11图 2 高眼压模型的建立（A、B 分别为暴露的大鼠眼球、正常的大鼠上巩膜静脉，，C、D 为烙闭成功的上巩膜静脉）Fig2 establishment of chronic glaucoma model
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R775.9

【参考文献】

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本文编号：2547106