暗饲养对大鼠视神经横断后无长突细胞TH表达的影响

发布时间：2019-11-17 15:27

【摘要】：目的:观察视神经横断后大鼠视网膜中多巴胺能无长突细胞上酪氨酸羟化酶的表达变化,并探讨暗饲养对这一表达变化的影响及意义。方法: SD大鼠144只随机分为正常组(12只)、假手术组(12只)及实验组(120只)。实验组动物于右侧眼球后极0.5cm处视神经鞘内切断视神经,并随机分为正常昼夜循环饲养组及暗饲养组,存活时间随机分为1、3、5、7、14d,共五大组(每组24只)。每个时间点又分为两个亚组(每组12只)。采用免疫组织化学、western blot等形态学、生物化学方法观察视神经横断后TH表达变化和突触颗粒改变,以及暗饲养对其的影响。结果:在正常大鼠视网膜,TH的表达主要在内网层,内核层可见少量阳性颗粒。假手术组与正常组中TH表达相近。视神经切断后正常昼夜循环饲养组1、3、5、7、14d的TH表达与正常组相比,1、3、5d时持续减少,5d时达最低值,7d时TH阳性面积恢复至正常水平,14d时阳性面积又有降低;视神经切断后暗饲养组1、3、5、7、14d的TH表达与正常组相比,1d时TH的阳性面积为最低值,3、5、7d持续增加,5、7dTH阳性面积达到正常水平,14d时,TH阳性面积减少。免疫荧光染色法计数视网膜中单位面积下TH阳性突触颗粒数,变化趋势与免疫组织化学结果基本一致,14d时,TH阳性突触颗粒数未见减少。 western blot检测结果与免疫组化基本一致。视神经切断后正常昼夜循环饲养组,与正常组相比,1、3、5d时TH蛋白质表达水平持续下调,5d时达最低值,7、14d时蛋白质表达水平明显上调,但并未达到正常水平;视神经切断后暗饲养组,与正常组相比,1d组TH蛋白质表达水平达最低值,3、5、7d蛋白质表达水平持续上调,5、7、14d时TH蛋白质表达水平达到正常水平。结论:视神经切断后无长突细胞TH表达呈应激性反应;暗饲养能在一定程度上维持视网膜内突触溃变关键期的TH表达强度。
【图文】：

昼夜循环,面积比,视神经,统计学意义

表 2 视神经横断后 DR 组视网膜 TH 的表达阳性面积（xˉ±s，n=6）组别正常饲养组（%）Nor 23.87±1.201d 12.83±0.62*3d 18.29±2.99*5d 21.76±0.987d 24.54±2.1114d 15.78±1.38**，与正常饲养组相比，p<0.05各时间点正常昼夜循环组与暗饲养组进行组内比较，暗饲养组与正常昼夜循环饲养组相比，1d 时 TH 的阳性面积比后者少、3d、5d 时 TH 的阳性面积比后者多其差异有统计学意义（P<0.05），如图 5。

颗粒数,视网膜,蛋白质表达,视神经

图 8 ONT 后 DC 组与 DR 组 TH 阳性颗粒数目比较nor：正常组；1d、3d、5d、7d、14d 为视神经横断后各组存活时间（*，，p<0.01）2.2 视网膜 TH 蛋白质表达水平的 western blot 检测为了检测视神经横断后整个视网膜内 TH 蛋白质表达水平的变化，取相应时间点大鼠视网膜匀浆进行 western blot 检测，结果与免疫组化基本一致。表 4 视网膜内中酪氨酸羟化酶 western 阳性相对值统计表（xˉ±s，n=6）组别正常饲养组暗饲养组Nor 0.95±0.051 0.69±0.0061d 0.44±0.055* 0.34±0.008*3d 0.28±0.017* 0.45±0.027*5d 0.11±0.031* 0.64±0.0097d 0.18±0.032* 0.70±0.01614d 0.41±0.030* 0.69±0.060
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R774.1

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