共焦显微镜联合暗视野显微镜在真菌性角膜炎中的应用研究

发布时间：2020-02-16 10:40

【摘要】：目的 1、对比活体真菌性角膜炎和真菌培养菌落中的菌丝和孢子的形态在共焦显微镜下是否一致,探讨共焦显微镜在真菌性角膜炎诊断中的诊断效果； 2、通过对比真菌性角膜炎角膜刮片前后的共焦显微镜图像变化,确定共聚焦显微镜最佳检查时间； 3、联合共焦显微镜检查,探讨暗视野显微镜在真菌性角膜炎早期诊断中的临床应用价值； 4、联合上述研究结果,探讨提高真菌性角膜炎的检出水平的方法。 方法 1、对34例(34只眼)典型真菌性角膜炎患者进行活体共焦显微镜检查,然后行角膜刮片后行真菌培养,得阳性结果后,将培养的菌落涂片行共焦显微镜检查,对比活体状态下及培养菌落的共焦显微镜图像。 2、对45例(45只眼)典型的真菌性角膜炎患者行共聚焦显微镜检查,发现真菌丝或孢子后,行角膜刮片,然后给患者做第二次活体共聚焦检查,对比刮片前后共聚焦显微镜图像。 3、对23例(23只眼)非典型的真菌性角膜炎进行活体共聚焦显微镜检查,再行角膜刮片涂片,先用普通显微镜查找真菌菌丝及孢子,发现可疑菌丝或孢子,再在暗视野显微镜下进行观察,对比普通显微镜及暗视野显微镜图像特征。 结果 1、活体真菌性角膜炎病灶和培养涂片中的菌丝、孢子在共焦显微镜下的形态基本一致。 2、在真菌性角膜炎刮片取材前,病灶中的菌丝在活体角膜共焦显微镜中结构完整、成像清晰。刮片取材后,病灶中的菌丝在共焦显微镜中结构不完整、成像较模糊,菌丝有断裂。 3、非典型真菌性角膜炎病灶中的菌丝在共焦显微镜中结构不完整、成像不清晰；在常规镜检下,成像不清甚至难以成像,不能对其进行确诊；但采用暗场显微镜检查能发现清晰的真菌菌丝。 结论 1、共聚焦显微镜检查活体真菌性角膜炎的菌丝、孢子与涂片培养的效果基本一致,其在真菌性角膜炎的研究和临床诊断方面具有重要的意义。 2、对真菌性角膜炎进行活体共焦显微镜的最佳检查时间应在角膜刮片前进行,以提高共焦显微镜对真菌性角膜炎的检出水平。 3、暗视野显微镜对于观察角膜刮片涂片中的菌丝是一种有效的检查方法,具有临床应用价值。 4、暗视野显微镜观察非典型真菌性角膜炎有着独特的优点,该方法联合常规涂片镜检及共焦显微镜检查能提高对非典型真菌性角膜炎的检出水平。
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图1一3临床共焦显微镜扫描原理示意图(二)共焦显微镜在真菌性角膜炎中的应用现状上个世纪末有学者提出，真菌菌丝在角膜组织中呈高折光性的、非平行的线性结构，直径约为6pm，在角膜全层均可发现，伴有分支状和交叉状特征[32]。还有学者认为真菌菌丝不易和角膜基质层中的结晶体相区别，而在感染期，不管是真菌性角膜炎或细菌性角膜炎，在角膜基质内都有大量的结晶体的沉积[33]。因此，如果在感染早期和治疗后期发现真菌菌丝才可能有临床意义。此外，真菌性角膜炎的共焦显微镜检查的阳性率高[29l。自共焦显微镜应用于真菌性角膜炎的临床诊断以来，相关的研究逐渐增多。采用共焦显微镜可见真菌的菌丝分支结构、隔膜、双重壁等，对诊断角膜深层真菌感染具有重要意

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本文编号：2580083