醛固酮对豚鼠耳蜗中Dot1l表达的调控作用

发布时间：2020-04-13 20:31

【摘要】：目的:膜迷路积水是梅尼埃病的病理基础,能由醛固酮诱导产生,但其机制尚不清楚。本实验通过研究组蛋白H3K79甲基化转移酶Dot1l在豚鼠耳蜗中的表达模式及醛固酮对Dot1l在豚鼠耳蜗中表达的调控,探讨Dot1l在膜迷路积水中的作用及机理,以期为梅尼埃病发病机制和治疗的研究提供新的线索。方法:将6只经ABR检测听力正常的豚鼠耳蜗切片,以免疫组织化学(IHC)检测Dot1l在豚鼠耳蜗中的表达模式。将28只经ABR检测听力正常的豚鼠随机分为对照组与实验组。实验组豚鼠腹腔注射醛固酮(1mg.kg-1.d-1),对照组腹腔注射生理盐水20ul,各7天。1月后再次以ABR检测两组豚鼠听阈后处死,应用HE染色检测豚鼠耳蜗形态学,以免疫组织化学(IHC)、Western blot检测Dot1l表达。结果:Dot1l表达于正常豚鼠耳蜗的血管纹、螺旋韧带、前庭膜、螺旋神经节、Corti器、螺旋缘、外螺旋沟根细胞,在螺旋韧带的表达由底转向顶转减少(P0.01),在螺旋神经节中的表达由底转向顶转逐渐增多(P0.05)。醛固酮作用后实验组听阈(18.57±6.02dBSPL)与对照组(20.71±4.74dBSPL)差异不具有显著性(P0.05)。实验组豚鼠耳蜗膜迷路积水率达到75%,对照组未观察到内淋巴积水。Western blot显示实验组耳蜗Dot1l表达明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。IHC显示醛固酮降低Dot11在血管纹、前庭膜、螺旋缘、柯蒂器、螺旋韧带等部位的表达。结论:豚鼠耳蜗中存在组蛋白H3K79甲基化转移酶Dot11。醛固酮可能通过抑制其表达引起膜迷路积水。
【图文】：

按前庭膜向前庭阶膨隆程度可将膜迷路积水分为轻、中、重度。正常豚鼠切逡逑片发现前庭膜未向前庭阶膨隆，蜗管面积由顶转到底转逐渐变小（图１）。造模完逡逑成后，对照组豚鼠耳蜗底转未见积水形成（图２ａ），实验组取１２只耳蜗进行观察，逡逑有９只出现轻度积水（图２ｂ），主要表现在底转，造模成功率７５％。逡逑ｍｍ逡逑图１正常豚鼠耳蜗切片ＨＥ染色逡逑Ｆｉｇ．邋１．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｃａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（邋ＨＥ邋ｘｌＯＯ）逡逑ｍｌ逡逑图２豚鼠耳蜗ＨＥ染色（ａ：对照组ｂ：实验组ＨＥ邋ｘｉ00）逡逑Ｆｉｇ．邋２．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｅａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（ａ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｂ：逡逑ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐ邋ＨＥｘｌ00）逡逑１４逡逑

２．３耳蜗形态学检测结果（ＨＥ染色）逡逑按前庭膜向前庭阶膨隆程度可将膜迷路积水分为轻、中、重度。正常豚鼠切逡逑片发现前庭膜未向前庭阶膨隆，蜗管面积由顶转到底转逐渐变小（图１）。造模完逡逑成后，，对照组豚鼠耳蜗底转未见积水形成（图２ａ），实验组取１２只耳蜗进行观察，逡逑有９只出现轻度积水（图２ｂ），主要表现在底转，造模成功率７５％。逡逑ｍｍ逡逑图１正常豚鼠耳蜗切片ＨＥ染色逡逑Ｆｉｇ．邋１．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｃａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（邋ＨＥ邋ｘｌＯＯ）逡逑ｍｌ逡逑图２豚鼠耳蜗ＨＥ染色（ａ：对照组ｂ：实验组ＨＥ邋ｘｉ00）逡逑Ｆｉｇ．邋２．邋Ｔｈｅ邋Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ｏｆ邋ｇｕｉｎｅａ邋ｐｉｇ邋ｃｏｃｈｌｅａｓ邋ｓｅｃｔｉｏｎｓ（ａ：邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ｂ：逡逑ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｇｒｏｕｐ邋ＨＥｘｌ00）逡逑１４逡逑
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R764

【参考文献】

相关期刊论文 前4条

1 蒋子栋;高帆;孙程成;;不同方法构建豚鼠膜迷路积水模型的对比研究[J];中华耳科学杂志;2015年04期

2 许庆庆;郭维维;翟所强;杨仕明;;耳蜗血管纹细胞离子转运的研究进展[J];中华耳科学杂志;2015年01期

3 温雅;钟时勋;;去氨加压素对耳蜗功能及上皮钠通道表达的调节作用[J];中华耳科学杂志;2014年03期

4 蒋子栋,张连山;醛固酮诱发豚鼠双耳膜迷路积水[J];中国医学科学院学报;2002年05期

本文编号：2626400