结膜瓣角膜全覆盖治疗中重度真菌性角膜炎的实验研究

发布时间：2020-06-26 07:57

【摘要】：目的:通过制备中重度真菌性角膜炎动物模型,探讨结膜瓣角膜全覆盖对治疗中重度真菌性角膜炎的疗效。方法:选用2-3kg不限雌雄的成年日本大耳白兔37只,按照完全随机设计分为模型组a组(n=35只),模型对照组b组(n=2只);均将右眼作为实验眼;用麦氏浊度仪调整黄曲霉菌浓度至10~8集落形成单位(colony forming unit,CUF),一个麦氏浊度单位(1号管)等于3*10~8CUF/ml。预实验接种方法采用层间注射法,正式实验选用角膜层间注射法联合角膜划痕法进行造模;将一个麦氏浊度单位再稀释3倍,用BD一次性使用无菌胰岛素注射器在右眼10点钟方位瞳孔旁中心基质层给予1U浓度为1*10~8CUF/ml的黄曲霉菌(1U=0.01ml)菌液。再用15°侧切刀片刮除右眼角膜中央直径约3-4mm范围的上皮组织,针头在角膜表面做井字划痕,深度约至浅基质层,将含黄曲霉菌菌丝液滴在角膜表面,术毕球结膜下注射1万单位庆大霉素注射液(0.5ml),对照组b组(n=2只)右眼作为对照眼除层间注射等量生理盐水及不涂抹真菌菌落外,其余过程同实验组。48小时后裂隙灯检查,随访观察待模型建造成功后行10%KOH涂片并乳酸酚棉蓝染色、真菌培养进一步进行实验确认。制备浓度为2.0%的伏立康唑液(瑞辉制药有限公司)~([1]),选用符合标准的动物模型,均等分为A、B、C三组各11只并加以标记以及实验对照组D组(n=2只)。A组给予2.0%结膜下注射伏立康唑0.5ml,B组给予结膜瓣角膜全覆盖,C组给予结膜瓣角膜全覆盖联合结膜下注射2.0%伏立康唑0.5ml的干预,实验对照D组(2只)给予等量生理盐水进行干预。给药频率:7天前1次/天,7天后1次/2天,14天后1次/3天。干预后在裂隙灯显微镜下观察角膜溃疡的愈合情况,连续观察3个月了解愈合及有无复发情况。采用spss 17.0统计软件进行统计学分析,定量数据采用均数±标准差分析,定量资料采用单样本t检验及方差分析(ANOVA)进行组间分析,定量资料组间两两比较用SNK法分析,定性资料组间比较采用卡方检验,P0.05差异有统计学意义。结果:预实验结膜瓣角膜全覆盖最终结果均为结膜瓣对合处缝线松脱,结膜瓣对合不良且分离,角膜上皮光滑,角膜水肿。正式实验使用层间注射联合角膜划痕法能成功建立模拟真菌性角膜炎结果,模型a组:其中2只为轻度真菌性角膜炎,其中15只为中度真菌性角膜溃疡以及18只属于重度真菌性角膜溃疡。模型对照b组:无感染。排除不适合本实验入选标准的2只兔子,造模成功率为94.29%。经过对真菌性角膜炎三种不同的干预方式后得出:经过比较A组(伏立康唑)、B组(结膜瓣覆盖术)以及C组(伏立康唑+结膜瓣覆盖术)后得出,C组愈合时间最短与A、B组比较有统计学意义(p0.05),A组效率高于B组差异具有统计学意义。结论:结膜瓣角膜覆盖法并不适用于无浅层角膜损伤的真菌性角膜炎。使用层间注射联合角膜划痕法能成功建立模拟真菌性角膜炎的动物模型,成功率较高。三种不同的干预方法中,伏立康唑联合结膜瓣角膜全覆盖治疗真菌性角膜炎的总有效率最高,达到治愈时间最短;单纯伏立康唑的有效率明显优于单纯结膜瓣角膜全覆盖。
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R779.6
【图文】：

图 17不同干预法治疗中、重度真菌性角膜炎在不同时间的疗Treatment of moderate and severe fungal keratitis with diffention methods at different times

图 3

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本文编号：2730046