鼻咽癌中C-fos的表达及与化疗敏感性和预后的关系

发布时间：2020-06-27 19:51

【摘要】：目的:鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是发生于鼻咽部表面黏膜的恶性肿瘤,具有明显的地域差异性,主要流行在中国南方以及东南亚地区,是继甲状腺癌之后最常见的头颈肿瘤。通过长期鼻内镜活检、手术切除标本、细胞学及动物体内研究等证实,鼻咽黏膜上皮的癌变是一个长期、多基因、多因素、多阶段的复杂过程。NPC的癌变机制与细胞的增殖、分化、凋亡、侵袭、转移等密切相关。多种原癌基因及抑癌基因参与NPC的发生发展过程,且有促进作用。目前,原癌基因的激活受到越来越多的关注,C-fos基因属于原癌基因家族中的核癌基因类,是鼠FBR和FBJ2骨肉瘤中的逆转录病毒基因V-fos的同源基因,当受到细胞外刺激时可快速被诱导转录表达,与C-jun蛋白结合形成异源二聚体AP-1复合物,参与调节下游靶基因的转录水平。已有研究发现,C-fos在结肠癌、骨肉瘤等恶性肿瘤中高表达且其蛋白产物的表达水平与肿瘤的恶性程度有关。同时也有文献报道shRNA干扰C-fos蛋白的表达可增加乳腺癌对化疗药物的敏感性,但有关C-fos蛋白在鼻咽癌中的表达及与化疗敏感性和预后的关系,当前仍缺乏明确的认识。本研究通过检测患者NPC组织、慢性鼻咽炎组织中C-fos蛋白的表达情况,分析其与临床病理因素、化疗药物敏感性和预后的关系,探讨C-fos在NPC组织中表达的作用和临床意义。方法:(1)回顾性选取西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科2014年3月至2016年8月间临床资料完整的75例(治疗前均行化疗敏感性检测)NPC组织标本,并选取同一时期的30例慢性鼻咽炎组织作为对照组;采用免疫组化EnVision两步法检测C-fos蛋白在上述组织标本中的表达情况,在显微镜下采集图像;利用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件检测每张照片的平均光密度值,并计算C-fos蛋白的相对表达量;解析C-fos蛋白在NPC组织、慢性鼻咽炎组织中的表达特征;并同时结合患者的临床病理资料进一步剖析C-fos蛋白与患者的临床病理参数之间的关系。(2)上述75例NPC患者在行放化疗治疗前,将活检取下来的新鲜癌组织制备成单细胞悬液,在体外进行培养;将氟尿嘧啶、顺铂、卡铂、奥沙利铂、紫杉醇、多西他赛、吉西他滨、环磷酰胺这8种临床上常见的化疗药物依据血浆峰值浓度(plasma peak concentration,PPC)分别稀释为不同的药物浓度(200%、100%、50%、25%、12.5%PPC)后,再加入到NPC细胞中与其共同培养;采用ATP生物荧光抗癌药物敏感性检测技术(ATP-TCA)检测NPC细胞对上述8种化疗药物的体外敏感性,最后将不同化疗药物对不同患者NPC细胞的抑制率进行统计分析。(3)对75例患者经治疗后定期门诊或电话随访,随访内容包括年龄、性别、门诊复查情况、复发转移、死亡情况等;结合C-fos蛋白在NPC患者组织中的表达情况和化疗敏感性的检测结果,分析C-fos蛋白在NPC中的表达与化疗敏感性和预后的关系。结果:(1)免疫组化结果显示C-fos在NPC组织中高表达,且主要表达于细胞核,呈棕色或棕褐色圆形颗粒状,部分在细胞质中表达,呈淡黄色,在慢性鼻咽炎组织的炎性细胞中几乎不表达;NPC组织与慢性炎组织的染色MOD值分别为0.151±0.037、0.079±0.030,C-fos蛋白在NPC中的表达量明显高于慢性鼻咽炎组织(P0.001);但C-fos蛋白的表达与性别(P=0.946)、年龄(P=0.953)、病理类型(P=0.088)、T分期(P=0.558)、N分期(P=0.249)、M分期(P=0.156)和临床分期(P=0.939)均无统计学意义(P均0.05)。(2)NPC细胞体外药敏试验显示:NPC对8种化疗药物的敏感性不同(P0.001),氟尿嘧啶的敏感率为84.00%,顺铂为89.33%,卡铂为92.00%,奥沙利铂为88.00%,紫杉醇为76.00%,多西他赛为58.67%,吉西他滨为61.33%,环磷酰胺为76.00%,其中卡铂的化疗敏感性最高,即耐药率最低。(3)随访结果显示:至随访截止时间2017年11月,75例NPC患者均获得随访,随访率为100%,随访时间为6~45个月,中位时间为23个月。在随访期间该75例NPC患者中,33例复发或转移,肿瘤总进展率为44.00%,其中C-fos蛋白低表达组中11例发生复发或转移,26例未发生,肿瘤进展率为29.73%,C-fos蛋白高表达组中,22例发生复发或转移,16例未发生,肿瘤进展率为57.89%;与C-fos蛋白低表达组的患者相比高表达组更易发生复发或转移。至截尾时间,NPC患者中22例患者死亡,且皆死于该疾病,53例患者存活,总生存率为70.66%。进一步分析C-fos蛋白与化疗敏感性的关系发现:高表达C-fos蛋白的NPC对紫杉醇的耐药率为34.21%,显著高于低表达C-fos NPC对紫杉醇的耐药率13.51%(P=0.036),其余7种化疗药物均无统计学差异。C-fos高表达组NPC患者的肿瘤进展率(57.89%,22/38)显著高于低表达组(29.73%,11/37)(χ~2=6.035,P=0.014),然而C-fos高表达组NPC患者的死亡率(36.84%,14/38)与低表达组(21.62%,8/37)无统计学差异(χ~2=2.095,P=0.148)。Log-rank分析显示C-fos高表达组NPC患者的无进展生存率显著差于低表达组(χ~2=7.032,P=0.008),而高表达组与低表达组间患者的总生存率无明显差异性(χ~2=3.139,P=0.076)。结论:(1)C-fos蛋白在NPC组织中高表达,提示C-fos蛋白可能与NPC的发生有关。(2)在NPC组织中C-fos蛋白的表达与患者的性别、年龄、病理类型、TNM分期及临床分期均无明显相关性。(3)NPC对氟尿嘧啶、顺铂、卡铂、奥沙利铂、紫杉醇、多西他赛、吉西他滨、环磷酰胺这8种化疗药物普遍敏感且敏感性不同。(4)C-fos蛋白在NPC高表达且与NPC肿瘤进展有关,且C-fos蛋白在NPC中高表达可能与紫杉醇的耐药相关。(5)检测NPC组织中C-fos的表达具有预测NPC对紫杉醇化疗敏感性和预测NPC肿瘤进展的潜力。
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.63
【图文】：

慢性炎,鼻咽部,图像

图1 C-fos在鼻咽部慢性炎及NPC组织中的表达C-fos蛋白在组织中表达的镜下图像(A-C: × 200; D-F: × 400)：A、D:正常对照；B、E：NPC低表达；C、F：NPC高表达。Figure 1 Expression of C-fos in Chronic Nasopharyngeal Nasopharynx and NPCMicroscopic image of C-fos protein expressed in tissues (A-C: × 200; D-F × 400): A, D:Normal control; B, E: NPC low expression; C, F: NPC overexpression.

慢性炎,鼻咽部

图1 C-fos在鼻咽部慢性炎及NPC组织中的表达织中表达的镜下图像(A-C: × 200; D-F: × 400)：A、D:正常NPC低表达；C、F：NPC高表达。 Expression of C-fos in Chronic Nasopharyngeal Nasopharynx image of C-fos protein expressed in tissues (A-C: × 200; D-F ×rmal control; B, E: NPC low expression; C, F: NPC overexpress

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