雷帕霉素经JAK2/STAT3通路诱导HGF处理的人晶状体上皮细胞凋亡的研究

发布时间：2020-12-07 01:00

　　目的：通过人肝细胞生长因子（hepatocyte growth gactor, HGF）处理人晶状体上皮细胞株HLE-B3,体外模拟后发性白内障（posterior capsule opacity, PCO）发生时晶状体上皮细胞（lens epithelial cells, LECs）所处的微环境,并用不同浓度的雷帕霉素（Rapamycin, RAPA）刺激HLE-B3,观察RAPA对HLE-B3增生、凋亡的影响,探讨RAPA影响HLE-B3的生长作用的分子机制。方法：1.培养HLE-B3：用含有10%FBS、100U/ml青霉素和100U/ml链霉素的低糖DMEM体外培养HLE-B3,并进行传代。2.实验分组：常规培养HLE-B3细胞系,生长至80%融合后,换用无血清DMEM培养基,分组如下：空白对照组：仅加入单纯DMEM,不加入RAPA或人HGF处理；阴性对照组（HGF组）：加入终浓度为lOng/ml的人HGF；HGF+RAPA组：用终浓度为10ng/ml的HGF处理LECs12h后,加入不同浓度的RAPA （A组：0.1ng/ml、B组：1ng/ml、C组：5ng/ml、D组10... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
实验材料和方法
    1. 实验材料
        1.1 实验细胞
        1.2 主要试剂及溶液配制
        1.3 主要实验器材及仪器
    2. 实验方法
        2.1 人晶状体上皮细胞细胞株HLE-B3的培养
        2.2 制作HLE-B3细胞爬片
        2.3 实验分组
        2.4 细胞增殖活力检测
        2.5 HLE-B3细胞病理形态学观察
        2.6 LIVE/DEAD细胞活性检测
        2.7 Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术
        2.8 RNA干扰和瞬时转染
        2.9 蛋白印迹分析
        2.10 细胞凋亡ELISA检测
    3. 统计学方法
结果
    1. RAPA对HGF（+）LECs细胞增殖的影响
        1.1 细胞增殖活力检测
        1.2 HLE-B3细胞病理形态学观察
    2. RAPA对HGF（+）LECs细胞凋亡的影响
        2.1 LIVE/DEAD细胞活性检测
        2.2 Annexin V-HTC/PI双染法流式细胞术细胞调亡检测
    3. JAK2/STAT3信号通路在RAPA对HGF（+）LECs细胞凋亡中的作用
        3.1 Western blot
        3.2 细胞凋亡ELISA检测
讨论
    1. RAPA对HGF（+）LECs细胞增生的影响
    2. RAPA对HGF（+）LECs细胞凋亡的影响
    3. JAK2/STAT3信号通路在RAPA诱导HGF（+）LECs细胞凋亡中的作用
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：2902325