基于转录组学测序的糖尿病视网膜早期病变治疗靶基因的筛选

发布时间：2020-12-19 11:04

　　目的:糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy,DR）是糖尿病最常见的并发症之一,炎症及氧化应激是糖尿病视网膜病变早期发病的重要途径,视网膜毛细血管内皮细胞是高血糖在疾病早期的重要靶器官之一。借助转录组学测序技术,挖掘高糖条件下恒河猴视网膜血管内皮细胞与炎症及氧化应激密切相关差异基因,筛选并验证得到糖尿病视网膜病变早期治疗的新靶点,从而为临床工作中DR的先期预防以及早期治疗提供分子生物学依据。方法:使用25mmol/L高糖刺激RF/6A细胞建立血管内皮细胞的高糖模型,经ELISA法、qRT-PCR法测定高糖模型下RF/6A中IL-6、TNF-α、MCP-1表达量,硝酸还原酶法检测高糖模型下细胞内一氧化氮水平,ROS+ER双染法及流式细胞法观察高糖刺激下RF/6A细胞内ROS表达水平,从而明确高糖模型的成功建立。在此基础之上利用RNA-Seq技术对25mmol/L高糖条件RF/6A细胞进行检测,正常培养的RF/6A细胞作为对照,通过基因本体分析,并结合大量的文献阅读分析糖尿病视网膜病变早期炎症及氧化应激过程相关的差异基因,并辅以qRT-PCR对靶基因的差异表达进行验证。... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ELI$A法到定离抽摸型下RFIBA中IL-&,TNFat.MGP-7衰达通

天津医科大学硕士学位论文 一、高糖诱导 RF/6A 糖尿病视网膜病变模型的建立糖组 IL-6、TNF-αmRNA 表达量呈不同程度的升高，MCP-1 mRNA 表达没有显著差异（图 2）。这些结果表明，高糖刺激 RF/6A 后，炎性细胞因子如 IL-6、TNF-α参与了高糖诱导的 RF/6A 炎症病理过程.

天津医科大学硕士学位论文 一、立（0.017± 0.011）明显升高，提示高糖1.2.3 高糖刺激下 RF/6A 细胞内 ROS 表我们以 ER-tracker Red 标记内质网，在荧光显微镜下观察，正常组细胞内绿生 ROS，而高糖模型下细胞内绿色荧RF/6A 细胞内 ROS 产量增高（图 3）。RF/6A 细胞内 ROS 表达水平进行定量5.4%）相比，高糖组（68.7±6.3%）细（P<0.01）（图 4）。由此我们可以得出结的产生，从而诱发下游一系列生理学变

【参考文献】：
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本文编号：2925791