视网膜小胶质细胞P2X7-NLRP3/Caspase-1通路在脉络膜新生血管中的作用机制

发布时间：2020-12-25 07:15

　　目的:研究C57BL/6J小鼠激光诱导脉络膜新生血管（CNV）形成过程中CD11b、P2X7、NLRP3/Caspase-1炎症小体和IL-1β的变化,探讨视网膜小胶质细胞通过P2X7-NLRP3/Caspase-1炎症小体通路介导的在CNV发生发展中的作用机制,为湿性AMD新的防治方法提供科学依据。方法:40只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组和CNV激光模型组。采用氪红激光照射（激光参数:波长647nm,能量200mW,光斑直径80um,照射时间100ms）视网膜,每只眼围绕视盘在其周围距离1个视盘直径的血管间光凝5个点。实验各组于激光照射后第4天取材,应用眼底荧光素血管造影（FFA）和光相干断层扫描（OCT）一体机以及苏木精-伊红染色（HE）观察激光照射处CNV是否形成;应用免疫荧光检测视网膜冰冻切片P2X7和NLRP3/Caspase-1炎症小体和IL-1β的表达情况;Western Blot检测CD11b、P2X7、NLRP3炎症小体、Caspase-1和IL-1β蛋白含量的表达;实时荧光定量PCR检测CD11b、P2X7、NLRP3炎症小体、Caspase-1和IL-1... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．?１视网膜小胶质细胞通过Ｐ２Ｘ７－ＮＬＲＰ３／Ｃａｓｐａｓｅ－１炎症小体通路对ＲＰＥ细胞和脉络膜血管??内皮细胞的作用机制示意图??

斑区早期可见强荧光改变，晚期荧光素渗漏扩大，呈边界模糊的高荧光区，??证明ＣＮＶ形成。ＯＣＴ示：正常对照组小鼠视网膜各层结果清晰，ＲＰＥ层连续；??模型组小鼠视网膜ＲＰＥ层不连续，可见梭性隆起的高信号（图３．１）。??Ｎｏｍａｌ?Ｌａｓｅｒ??臓??ｍａｍ??ＭＭ??图３．１?ＦＦＡ示：正常对照组视网膜的血管以视盘为中心呈放射状改变，脉络膜血管呈网状分布，视网膜血??管充盈良好，未见异常荧光素渗漏；激光造模组激光斑区早期可见强荧光改变，晚期荧光素渗漏扩大，呈??边界模糊的高荧光区，证明ＣＮＶ形成。ＯＣＴ示：正常对照组小鼠视网膜各层结果清晰，ＲＰＥ层连续；模型组小??鼠视网膜ＲＰＥ层不连续，可见梭性隆起的高信号。??１４??

?■■■??图３．?４视网膜冰冻切片ＣＤ１１ｂ和Ｐ２Ｘ７染色。Ｍｅｒｇｅ图中激光斑处黄色箭头所指为两种抗体共标的阳性细胞。??（ＧＣＬ：神经节细胞层；１ＮＬ：内核层；ＯＮＬ：外核层）ＩＦ＊２００??１６??


本文编号：2937195