miR-326-3p对视网膜祖细胞分化调控作用的研究

发布时间：2021-01-08 09:04

　　目的探讨微小RNA-326-3p（miR-326-3p）在视网膜祖细胞（RPCs）分化过程中的作用,旨在为干细胞移植治疗视网膜退行性疾病研究提供新的思路。方法将RPCs随机分为对照组（Control组）、miR-326-3p过表达组（Mimics组）和miR-326-3p敲降组（Inhibitors组）,在分化培养基中培养7 d后,分别转染miR-326-3p-Control、Mimics和Inhibitors,转染48 h后收取细胞RNA和蛋白,通过q PCR实验和Western blotting实验检测RPCs分化指标胶质细胞标记物（GFAP）、双极神经元标记物（PKC-a）、视杆细胞标记物（Rhodopsin）、视锥和视杆细胞标记物（Recoverin）和中间神经元标记物β3-微管蛋白（β3-tubulin）在3组中的表达量。结果 （1） miR-326-3p在视网膜祖细胞分化过程中的表达量明显增加;（2）与Control组相比,Mimics组中miR-326-3p过表达后RPCs分化指标GFAP、PKC-a、Rhodopsin、Recoverin和β3-tubulin表达量明显... 

【文章来源】：临床眼科杂志. 2020,28(04)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

qPCR和Western blotting法检测RPCs分化过程中GFAP、PKC-a、Rhodopsin、Recov-erin和β3-tubulin的mRNA和蛋白表达水平(*示P<0.05)

RPCs分别在分化培养基中培养0、1、4、7 d,qPCR实验证明RPCs分化过程中内源性miR-326-3p的mRNA表达水平不断地增加，提示miR-326-3p可能在RPCs细胞分化中发挥重要作用(图2)。三、检测miR-326-3p过表达敲降效率

过表达miR-326-3p后，在mRNA和蛋白水平RPCs分化指标GFAP、PKC-a、Rhodopsin、Recoverin和β3-tubulin相比较于对照组都有明显的增加，表明miR-326-3p促进RPCs分化，特别是向视网膜神经元细胞分化能力增强(PKC-a、Rhodopsin、Recoverin表达量上升的更加明显);而敲除miR-326-3p后，这些分化指标相比较于对照组都有明显的降低，表明敲除miR-326-3p后抑制RPCs的分化(图4)。讨论


本文编号：2964317