角膜胶原交联治疗真菌性角膜炎的实验性研究
发布时间：2021-01-24 17:25
目的真菌性角膜炎是一种严重的致盲眼病,然而角膜胶原交联术（Corneal Collagen Corss-linking,CXL）对真菌性角膜炎的疗效仍有争议。我们分别建立了体内和体外两种模型,以便更好的评估角膜胶原交联对真菌性角膜炎的治疗作用。材料与方法体外实验,对培养皿内的腐皮镰刀菌进行不同时间UVA照射,动态观察各组培养皿内的真菌活力。马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）倾注平皿,腐皮镰刀菌菌株接种后,置于25℃的真菌培养箱孵育72h。用无菌生理盐水配制孢子悬液,并调整菌悬液浓度至10^6CFU/ml。用加样枪吸出200ul孢子悬液,在培养皿上涂布均匀,置于25℃的真菌培养箱孵育。24h后将培养皿取出,随机分为四组:对照组（不进行任何操作）、角膜胶原交联组（核黄素/紫外线）、核黄素组、紫外线组。其中,角膜胶原交联组和紫外线组各自分为5个亚组,分别进行2min、5min、l0min、20min、30min等不同时间的照射,动态观察各组真菌活力。培养皿内取真菌灰度值一致,直径6mm大小培养基区域。在角膜胶原交联组和核黄素组滴加0.1%核黄素溶液20ul,避光保存30min。仅对角膜胶原交联...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：35 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．?１：角膜胶原交联体外灭活真菌实验
各组小鼠角膜病变严重程度进行临床评分和拍照，角膜胶原交联２ｍｉｎ治疗??组和角膜胶原交联３ｎｉｉｎ治疗组不同时间点评分较对照组显著降低（户＜０．?０５），??见图２．?３Ａ、Ｂ。Ａ．各组连续１０ｄ相同时间点眼前节照相Ｂ．?Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ施雷伯动??态观察评分．Ｃ．各组小鼠角膜载菌量计数．Ｄ．各组小鼠角膜载菌量和角膜病变严??重程度相关性的散点图．Ｍｅａｎ?土?ＳＤ，ｎ＝１０，林ｐ＜０．?Ｏｌ．ｖｓ非治疗组??经Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析检验，交联组小鼠角膜的载菌量与角膜炎症评分呈明??显正相关（图１），结果显示，角膜载菌量和角膜病变严重程度呈明显正相关〇－??０．７２３，片０．０４３）。造模成功后３６ｈ，取各组小鼠角膜组织培养，对真菌菌落??进行计数，角膜胶原交联２ｍｉｎ治疗组和角膜胶原交联３ｍｉｎ治疗组角膜载菌量??计数显著小于非治疗组（片〇．?００３）。各组小鼠的真菌活力与角膜临床评分进行??Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析，结果显示各组的菌落数和角膜病变严重程度呈正相关ｒ??二０．?７７１，Ｐ?＝０．?００９；?ｒ?＝０．?６７８，Ｐ?＝０？?０３１；?ｒ?＝０？?７０７，Ｐ?＝０？?０２２，
图?２．４Ａ、?Ｂ、?Ｃ、?Ｄ。??造模成功后第ｌ〇ｄ对各组小鼠角膜组织进行ＨＥ染色病理组织学检查、计数??各组中性粒细胞百分比，见图２．?４。Ａ组非治疗组：角膜完整性破坏，上皮细胞??不规则，基质纤维破坏严重，炎症细胞７２．?６５％浸润程度三级，内皮层破坏。Ｂ??组角膜胶原交联３ｍｉｎ治疗组：角膜基质部分胶原纤维的排列紊乱，炎症细胞??４３．?６７％浸润程度二级，角膜后弹力层、内皮层部分缺失。Ｃ组角膜胶原交联２ｍｉｎ??治疗组：角膜基质部分胶原纤维的排列紊乱，炎症细胞１３．?２９％浸润程度一级，??角膜后弹力层、内皮层部分缺失，见图２．?５Ａ、Ｂ。??１５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Corneal collagen cross-linking and liposomal amphotericin B combination therapy for fungal keratitis in rabbits[J]. Zhao-Qin Hao,Jin-Xin Song,Shi-Yin Pan,Lin Zhang,Yan Cheng,Xian-Ning Liu,Jie Wu,Xiang-Hua Xiao,Wei Gao,Hai-Feng Zhu. International Journal of Ophthalmology. 2016(11)
[2]Evaluation of the in vitro antimicrobial properties of ultraviolet A/riboflavin mediated crosslinking on Candida albicans and Fusarium solani[J]. Bing Sun,Zhi-Wei Li,Hai-Qun Yu,Xiang-Chen Tao,Yong Zhang,Guo-Ying Mu. International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2014(02)
本文编号：2997638
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：35 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．?１：角膜胶原交联体外灭活真菌实验
各组小鼠角膜病变严重程度进行临床评分和拍照，角膜胶原交联２ｍｉｎ治疗??组和角膜胶原交联３ｎｉｉｎ治疗组不同时间点评分较对照组显著降低（户＜０．?０５），??见图２．?３Ａ、Ｂ。Ａ．各组连续１０ｄ相同时间点眼前节照相Ｂ．?Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ施雷伯动??态观察评分．Ｃ．各组小鼠角膜载菌量计数．Ｄ．各组小鼠角膜载菌量和角膜病变严??重程度相关性的散点图．Ｍｅａｎ?土?ＳＤ，ｎ＝１０，林ｐ＜０．?Ｏｌ．ｖｓ非治疗组??经Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析检验，交联组小鼠角膜的载菌量与角膜炎症评分呈明??显正相关（图１），结果显示，角膜载菌量和角膜病变严重程度呈明显正相关〇－??０．７２３，片０．０４３）。造模成功后３６ｈ，取各组小鼠角膜组织培养，对真菌菌落??进行计数，角膜胶原交联２ｍｉｎ治疗组和角膜胶原交联３ｍｉｎ治疗组角膜载菌量??计数显著小于非治疗组（片〇．?００３）。各组小鼠的真菌活力与角膜临床评分进行??Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析，结果显示各组的菌落数和角膜病变严重程度呈正相关ｒ??二０．?７７１，Ｐ?＝０．?００９；?ｒ?＝０．?６７８，Ｐ?＝０？?０３１；?ｒ?＝０？?７０７，Ｐ?＝０？?０２２，
图?２．４Ａ、?Ｂ、?Ｃ、?Ｄ。??造模成功后第ｌ〇ｄ对各组小鼠角膜组织进行ＨＥ染色病理组织学检查、计数??各组中性粒细胞百分比，见图２．?４。Ａ组非治疗组：角膜完整性破坏，上皮细胞??不规则，基质纤维破坏严重，炎症细胞７２．?６５％浸润程度三级，内皮层破坏。Ｂ??组角膜胶原交联３ｍｉｎ治疗组：角膜基质部分胶原纤维的排列紊乱，炎症细胞??４３．?６７％浸润程度二级，角膜后弹力层、内皮层部分缺失。Ｃ组角膜胶原交联２ｍｉｎ??治疗组：角膜基质部分胶原纤维的排列紊乱，炎症细胞１３．?２９％浸润程度一级，??角膜后弹力层、内皮层部分缺失，见图２．?５Ａ、Ｂ。??１５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Corneal collagen cross-linking and liposomal amphotericin B combination therapy for fungal keratitis in rabbits[J]. Zhao-Qin Hao,Jin-Xin Song,Shi-Yin Pan,Lin Zhang,Yan Cheng,Xian-Ning Liu,Jie Wu,Xiang-Hua Xiao,Wei Gao,Hai-Feng Zhu. International Journal of Ophthalmology. 2016(11)
[2]Evaluation of the in vitro antimicrobial properties of ultraviolet A/riboflavin mediated crosslinking on Candida albicans and Fusarium solani[J]. Bing Sun,Zhi-Wei Li,Hai-Qun Yu,Xiang-Chen Tao,Yong Zhang,Guo-Ying Mu. International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2014(02)
本文编号：2997638
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