EB病毒Rta优势表位抗原的克隆表达及在应用ELISA诊断鼻咽癌中的价值

发布时间：2021-04-25 16:01

　　目的制备高活性EB病毒立即早期蛋白Rta优势表位抗原,并初步评价该抗原在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）诊断中的价值。方法分析Rta氨基酸序列,选取抗原优势表位Rta（301～440aa）,合成目的基因,连接pBVGST-6His载体,构建重组pBV-Rta表达质粒,进行诱导表达获得纯化抗原。采用间接ELISA初步评价优势表位抗原在鼻咽癌诊断中的价值,以纯化的pBV-Rta优势表位抗原为包被抗原,抗人IgA,IgG和IgM为二抗,检测由烟台毓璜顶医院提供的50例经临床病理确诊的NPC患者血清样本和90例健康体检者血清样本。结果获得了高效原核表达的pBV-Rta优势表位抗原（301～440aa）,经过小样本验证,确定pBV-Rta具有良好的抗原活性和特异度。放大样本进行检测,基于Rta优势表位抗原的Rta-IgG间接ELISA方法检测灵敏度和特异度分别为73.08%和95.79%。Rta-IgG检测的AUC值为0.860。结论 Rta优势表位抗原pBV-Rta是优选的可以用于Rta-IgG检测的抗原,利用该抗原所建立的间接ELISA检测方法可以很好地区... 

【文章来源】：现代检验医学杂志. 2020,35(05)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 研究对象
    1.2 仪器与试剂
    1.3 方法
        1.3.1 Rta抗原表位分析及优势表位抗原区段的确定：
        1.3.2 Rta优势表位抗原基因克隆与表达：
        1.3.3 抗原纯化及制备：
        1.3.4 间接ELISA法建立及抗原活性鉴定：
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 Rta抗原表位分析及优势表位目的基因的确定
    2.2 Rta优势表位抗原表达、纯化与鉴定
    2.3 Rta优势表位抗原活性初步评价
    2.4 NPC患者血清中Rta-Ig G抗体检测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]鼻咽癌患者血清EB病毒Rta-IgG、VCA-IgA、EA-IgA抗体与其临床表现的关系[J]. 何流,张雷.  解放军医药杂志. 2020(02)
[2]EB病毒感染与鼻咽癌诊治的研究进展[J]. 孙畅,路顺,郎锦义.  肿瘤预防与治疗. 2018(05)
[3]EB病毒感染的实验室诊断研究进展[J]. 陈刚.  中国热带医学. 2018(03)
[4]鼻咽癌与EB病毒立即早期蛋白的应用进展[J]. 赵新星,张龙城.  临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2016(13)
[5]EB病毒Rta蛋白在鼻咽癌早期诊断中的研究进展[J]. 祝元雪,李晓江.  现代肿瘤医学. 2013(12)
[6]基于2008分期标准的壮族鼻咽癌各期患者中EB病毒Zta/IgG等抗体阳性率的比较[J]. 李晓华,蒙以良,漆光紫,黄承乐,黄钜略,黄衍强.  现代免疫学. 2013(02)
[7]The prevalence and prevention of nasopharyngeal carcinoma in China[J]. Malcolm J. Simons.  癌症. 2011(02)
[8]以Rtac2/3为抗原用于鼻咽癌病人检测的初步研究[J]. 任军,张晓梅,张晓光,李红霞,周玲,曾毅.  中华微生物学和免疫学杂志. 2006(11)



本文编号：3159675