敲除CCR3基因通过PI3K/Akt信号通路抑制小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒的实验研究

发布时间：2021-12-17 08:36

　　第一部分:PI3K/Akt信号通路参与小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒的研究目的:研究PI3K/Akt信号通路对EOS脱颗粒、增殖及迁移作用的影响。方法:1.通过提取野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞进行原代培养,在SCF及rm-FLt3及IL-5细胞因子的诱导下促进其分化为成熟的嗜酸性粒细胞2.通过瑞氏染色观察嗜酸性粒细胞形态学特征,通过流式细胞术检测嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F的表达检测嗜酸性粒细胞的纯度3.实验分组:对照组、PI3K激动剂组（740Y-P）、PI3K抑制剂组（Ly294002）。通过CCK8分别检测不同浓度的PI3K抑制剂Ly294002及PI3K激动剂（740Y-P）对嗜酸性粒细胞增值活力的影响。ELISA检测嗜酸性粒细胞脱颗粒蛋白EPO的表达;Transwell检测嗜酸性粒细胞的迁移变化。Western Blot检测三组的P-AKT、AKT蛋白的表达情况结果:1.在同一时间点,与对照组比较,10uM、20uM的Ly294002均能抑制EOS的增殖活力,且在培养6h时,10uM Ly294002已表现出对EOS增殖活力的抑制（p<0.05）,且20... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

野生型小鼠原代嗜酸性粒细胞光镜观察（倒置显微镜100x放大）

检测嗜酸性粒细胞表面抗原 Siglec-F 表细胞膜可表达 Siglec-F 抗原，取小鼠骨髓体行表面抗原 Siglec-F 流式细胞检测，测定，明确培养的嗜酸性粒细胞纯度以便后续实性粒细胞 Siglec-F 表达率>90%，可用于后鼠原代嗜酸性粒细胞瑞氏染色(400 x)，箭头所指为

细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面抗原 粒细胞细胞膜可表达 Siglec-F 抗原，取胞进行表面抗原 Siglec-F 流式细胞表达率，明确培养的嗜酸性粒细胞纯度型嗜酸性粒细胞 Siglec-F 表达率>90%生型小鼠原代嗜酸性粒细胞瑞氏染色(400 x


本文编号：3539764