miR-200c/Zeb1负反馈回路对眼内肿瘤上皮间质转化及成瘤性的作用

发布时间：2023-02-05 11:00

　　目的 研究microRNA-200c与Zeb1构成的双向负反馈调节通道对眼内恶性肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)、成瘤能力及迁徙转移能力的调控作用。 方法 1) miR-200c对眼内肿瘤上皮间质转化及迁徙能力的调控。①建立miR-200c过表达及表达抑制的细胞模型。应用miR-200c的模拟物和抑制剂对人眼脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1、人视网膜母细胞瘤细胞株WERI-RB1和Y79进行瞬时转染,在三个细胞株中建立miR-200c过表达及表达抑制的细胞模型。通过对miR-2O0c载体所携带的FAM荧光对转染后的细胞内的荧光表达情况进行荧光显微镜下的肉眼观察,初步评估转染效率。应用实时定量PCR对转染前后各株细胞中miR-200c的表达水平进行检测进一步评估转染效率。②miR-200c对其靶基因——上皮间质转化过程的重要转录因子Zeb1的调节作用。使用实时定量PCR、免疫印迹法及免疫荧光等分子生物学检测方法对OCM-1、WERI-RB1和Y79细胞miR-200c转染前后细胞内的Zeb1因子在mRNA和蛋白水平的表达进行检测,以验证miR-200c在眼内肿瘤对Zebl的调控作用。③miR...

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
符号说明
前言
第一章 miRNA-200c对眼内肿瘤细胞上皮-间质转化和迁徙能力的影响
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
第二章 miR-200c对眼内肿瘤细胞干性功能的调节作用
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
第三章 Zeb1对miR-200c的反馈抑制及对OCM-1细胞的调节作用
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 结论
全文总结
参考文献
综述
    参考文献
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致谢



本文编号：3734853