NIDD/nNOS和nNOS抑制剂L-NAME在DBA/2J小鼠青光眼发病过程中的作用

发布时间：2023-03-14 21:43

　　背景青光眼是一种严重的不可逆性致盲性眼病,其对人类的视力损害仅次于白内障。青光眼病理过程为进展性视神经变性,眼压异常升高是青光眼发病过程中的主要危险因素,但是患者即使眼压被控制在正常水平,视功能损害仍可能继续发展。视网膜视神经节细胞(RGCs)死亡是其视神经损伤的最终共同通路,RGCs的病理改变和凋亡机制在青光眼发病过程中起到了重要作用。NIDD基因是一种与nNOS分子相关的DHHC主导的包含树突状mRNA结构域的蛋白质,其主要通过与nNOS主导的PDZ结构域的相互作用上调nNOS酶的活性。nNOS酶的活性与胶质细胞活化有关。胶质细胞活化尤其是视网膜中的Muller细胞的活化可能是青光眼中RGCs凋亡的一个重要因素。 目的本研究旨在根据DBA/2J小鼠中一系列眼部表型变化,建立DBA/2J小鼠青光眼临床诊断标准,并研究DBA/2J小鼠视网膜中NIDD/nNOS的表达变化及其与青光眼表型和RGCs凋亡的相关性。 方法3至15月龄的清洁级DBA/2J小鼠共计100只,对其进行眼前节裂隙灯检查,眼底照相,眼压测量,杯盘比凹陷和视神经轴突计数等检查,结合月龄将DBA/2J小鼠分为正常组(nor...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
绪论
材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 DBA/2J小鼠眼部表型检查
            2.2.1.1 DBA/2J小鼠裂隙灯检查和眼底照相
            2.2.1.2 眼压测量
            2.2.1.3 眼球冰冻切片HE染色
            2.2.1.4 视神经组织PPD染色
        2.2.2 DBA/2J小鼠分组
        2.2.3 腹腔注射
        2.2.4 逆转录PCR
            2.2.4.1 mRNA的制备
            2.2.4.2 逆转录反应
            2.2.4.3 PCR反应
            2.2.4.4 RT-PCR结果分析
        2.2.5 Western Blot
        2.2.6 免疫组化
        2.2.7 免疫荧光
        2.2.8 TUNEL染色
        2.2.9 统计分析
结果
    3.1 DBA/2J小鼠眼前节和眼压变化
    3.2 DBA/2J小鼠视乳头和视神经病理组织学检查
    3.3 DBA/2J小鼠青光眼发展过程中NIDD/nNOS mRNA和蛋白表达变化
    3.4 N1DD/nNOS在DBA/2J小鼠视网膜组织中的分布
    3.5 眼压升高后NIDD/nNOS的共定位关系
    3.6 NIDD/nNOS细胞定位
    3.7 L-NAME对DBA/2J小鼠眼前节和眼压的影响
    3.8 L-NAME对NIDD的表达的影响和RGCs的保护作用
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目
    A：在国内外刊物上发表的论文
    B：在国际学术会议上发表的论文
致谢



本文编号：3762806