槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响

发布时间：2017-05-20 12:26

  本文关键词：槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本实验通过观察槲皮素(QUE)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及其凋亡调控基因bcl-2、bax表达的影响,探讨槲皮素对糖尿病大鼠晶状体的保护作用。方法:1、体重150g-180g雄性SD大鼠60只,经裂隙灯显微镜检查排除双眼晶状体病变及其它眼部疾病。适应性喂养7d后禁食12h,不禁饮,随机抽取40只予以腹腔注射1%链脲佐菌素,剩余20只大鼠则设置为正常对照组(对照组),腹腔注射等体积0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液。72h后尾静脉取血,测得空腹血糖≥16.7mmol/L为造模成功。2、将糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(糖尿病组)和槲皮素干预组(槲皮素组)。自造模成功第二天起,槲皮素组每日给予槲皮素50mg/kg灌胃,糖尿病组和对照组每天给予等体积0.5%羧甲基纤维素(CMC)灌胃。实验过程中对大鼠饮食、饮水、尿量、精神等一般情况进行每日观察及记录,每周称量体重1次并记录,每2周检测血糖1次。3、使用复方托吡卡胺滴眼液给以大鼠双眼充分散瞳,采用数码裂隙灯显微镜每周1次对各组晶状体混浊程度进行观察并记录。分别于STZ注射后4周、8周处死各组大鼠5只,12周时处死各组剩余大鼠。摘除眼球,分离晶状体,每组各时间点取5只晶状体用于固定包埋,制备石蜡切片用于HE染色及免疫组织化学法检测晶状体上皮细胞中bcl-2和bax的表达情况。各组剩余晶状体用于制备细胞悬液检测细胞凋亡。结果:1、一般情况:对照组大鼠生长状况良好;采用STZ腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型,40只大鼠均造模成功并纳入实验,所有模型大鼠均出现“多饮、多食、多尿”的典型糖尿病表现。2、血糖:在实验4周、8周、12周,糖尿病组和槲皮素组血糖均高于对照组(P0.05),但糖尿病组与槲皮素组比较差异不具有统计学意义(P0.05)。3、晶状体混浊情况:在实验研究过程中,对照组大鼠晶状体始终保持透明,随着实验进展,4周时糖尿病组、槲皮素组大鼠晶状体均开始出现不同程度混浊。4周、8周和12周时糖尿病组、槲皮素组晶状体混浊程度均比对照组重(P0.05),糖尿病组晶状体混浊程度比槲皮素组更重(P0.05)。4、HE染色:对照组晶状体上皮细胞为单层立方上皮,细胞形态规则,分布均匀,外包绕晶状体囊膜,晶状体纤维细胞未见异常。糖尿病组、槲皮素组晶状体上皮细胞形态不规则,多呈扁平状或柱状,胞质疏松染色淡,可见空泡,赤道至后囊区域内晶状体纤维细胞内可见大量未被降解的细胞器,但槲皮素组较糖尿病组少。5、免疫组化:bcl-2在三组均呈阳性表达,在4周、8周、12周时对照组与糖尿病组、槲皮素组之间表达差异有统计学意义(P0.05),而随着实验进展,糖尿病组、槲皮素组表达逐渐减少,且糖尿病组弱于槲皮素组,差异有统计学意义(P0.05);bax在各组则均呈阳性表达,在4周、8周、12周时对照组与糖尿病组、槲皮素组之间表达差异有统计学意义(P0.05),随着实验进展,糖尿病组、槲皮素组表达均逐渐增强,且糖尿病组bax的表达强于槲皮素组(P0.05)。6、细胞凋亡:STZ注射后4周、8周、12周时糖尿病组大鼠晶状体上皮细胞的凋亡率显著高于对照组,槲皮素组晶状体上皮细胞凋亡率较糖尿病组显著降低,但仍高于对照组。各时间点三组之间两两比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:1、槲皮素对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡有抑制作用。2、槲皮素可能通过增强bcl-2的表达与降低bax的表达来对抗糖尿病大鼠晶状体上皮细胞的凋亡,抑制晶状体混浊。3、槲皮素可能通过抑制晶状体上皮细胞凋亡与晶状体纤维细胞中细胞器的异常降解来延缓糖尿病大鼠白内障的形成。
【关键词】：槲皮素 细胞凋亡 晶状体上皮细胞 糖尿病性白内障 bcl-2 bax
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R776.1
【目录】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-20
• 结果20-29
• 讨论29-37
• 结论37-38
• 参考文献38-44
• 中英文缩略词对照表44-45
• 致谢45-46
• 综述 槲皮素对晶状体保护作用研究进展46-58
• 参考文献52-58

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本文编号：381644