RNA干扰抑制高迁移率族蛋白-1表达对人视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2025-01-09 03:28

　　 目的:研究siRNA抑制高迁移率族蛋白-1(high mobility group protein box-1, HMGB1)表达对人视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:RT-PCR和Western blot检测HMGB1在人视网膜母细胞瘤中的表达。体外化学合成靶向HMGB1 siRNA,RT-PCR和Western blot检测其抑制效率。MTT法检测HMGB1沉默后Y79细胞的增殖情况。Caspase-3活性检测试剂盒检测HMGB1沉默后Y79细胞的凋亡情况。采用流式细胞仪来分析细胞周期的分布以及细胞凋亡率的变化。结果:HMGB1 mRNA和蛋白在人视网膜母细胞瘤细胞中高表达,siRNA抑制HMGB1表达后,Y79细胞增殖抑制,促进凋亡。结论:抑制HMGB1的表达可以降低人视网膜母细胞瘤细胞的增殖,并促进其凋亡,为人视网膜母细胞瘤的生物学治疗提供新的思路。

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 细胞培养
    1.2 Real-time PCR
    1.3 Western blot
    1.4 RNA干扰
    1.5 细胞增殖抑制实验
    1.6 Caspase-3活性检测
    1.7 流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 HMGB1 mRNA在各细胞系中的转录水平
    2.2 Western blot检测HMGB1蛋白在各细胞系中的表达
    2.3 Real time-PCR 检测siRNA抑制Y79细胞HMGB1 mRNA表达水平
    2.4 Western blot检测siRNA抑制Y79细胞HMGB1蛋白表达水平
    2.5 MTT法检测HMGB1 siRNA对Y79细胞增殖能力的影响
    2.6 沉默HMGB1诱导Y79细胞的Caspase-3激活作用
    2.7 HMGB1 siRNA 对Y79细胞周期的影响
    2.8 HMGB1 siRNA对Y79细胞凋亡的影响
3 讨论



本文编号：4025078