FLRT2对鼻中隔软骨细胞生物学特性的影响

发布时间：2017-08-16 02:23

  本文关键词：FLRT2对鼻中隔软骨细胞生物学特性的影响

  更多相关文章： FLRT2 慢病毒感染 鼻中隔软骨细胞 软骨形成 生物学特性

【摘要】：[目的]建立FLRT2(Fibronectin Leucine Rich Transmembrane-2)敲减后SD乳鼠鼻中隔软骨细胞(nasal septal chondrocyte,NSC)模型,观察FLRT2敲减前后鼻中隔软骨细胞生物学特性的差异,为探讨FLRT2对鼻中隔软骨的形成过程和在面中分生长发育中的作用机制提供理论基础。 [方法]用机械分离和酶联消化法将出生1-3天SD乳鼠的鼻中隔软骨细胞进行培养。对生长状态良好的软骨细胞进行FLRT2-shRNAi慢病毒感染,采用噻唑蓝(methyl hiazolyl tetraxolium, MTT)比色法绘制鼻中隔软骨细胞FLRT2-shRNAi慢病毒感染后的生长曲线；划痕实验观察鼻中隔软骨细胞划痕4小时、8小时后细胞迁移能力的变化；实时荧光定量PCR (real time quantitative polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测FLRT2敲减后鼻中隔软骨细胞N-钙粘蛋白(N-Cadherin)Ⅱ型胶原(type Ⅱ collagen, Col Ⅱ)、聚集蛋白多糖(aggrecan, AGG)、Sox-9mRNA表达的变化。 [结果]成功建立了FLRT2-shRNAi慢病毒感染后的鼻中隔软骨细胞模型。MTT检测法显示,感染FLRT2-shRNAi慢病毒的鼻中隔软骨细胞表达相对于对照组总是最低,说明FLRT2敲减以后,细胞的增殖受到了抑制,且在第四天至第六天差异明显；细胞划痕实验结果表明,FLRT2-shRNAi慢病毒感染后的鼻中隔软骨细胞的迁移率较NC-shRNAi慢病毒感染后的鼻中隔软骨细胞(阴性对照组)的迁移率低,说明FLRT2可促进鼻中隔软骨细胞迁移。RT-PCR显示,FLRT2-shRNAi感染的鼻中隔软骨细胞中N-cadherin mRNA的表达较阴性对照组明显增加；ColⅡ、AGG、Sox-9mRNA在FLRT2-shRNAi感染组的鼻中隔软骨细胞中的表达都有所降低,说明FLRT2可抑制N-cadherin合成,促进Col Ⅱ、AGG、Sox-9的合成。 [结论]1.成功建立SD乳鼠鼻中隔软骨细胞FLRT2-shRNAi'慢病毒感染后的模型。2.MTT检测以及细胞划痕实验说明FLRT2可促进鼻中隔软骨细胞的增殖和迁移。3.实时定量PCR显示FLRT2可降低N-cadherin mRNA的表达,抑制细胞粘附,并且促进鼻中隔软骨细胞细胞外基质ColⅡ、AGG及Sox-9生成增加,进而调节软骨形成。
【关键词】：FLRT2 慢病毒感染 鼻中隔软骨细胞 软骨形成 生物学特性
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R765.9
【目录】：

• 英文缩写词表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 第一部分 SD乳鼠鼻中隔软骨细胞FLRT2敲减模型的建立13-25
• 材料13-14
• 方法14-16
• 结果16-23
• 讨论23-24
• 结论24-25
• 第二部分 FLRT2对鼻中隔软骨细胞形态学表达的探索25-33
• 材料25-26
• 方法26-27
• 结果27-30
• 讨论30-32
• 结论32-33
• 第三部分 FLRT2对鼻中隔软骨形成相关基因的影响33-43
• 材料34
• 方法34-36
• 结果36-40
• 讨论40-42
• 结论42-43
• 全文总结43-44
• 参考文献44-47
• 文献综述47-54
• 参考文献53-54
• 发表文章54-55
• 致谢55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈少坚;郭风劲;;Sox9基因促软骨形成作用机制研究进展[J];国际骨科学杂志;2010年02期

2 袁红梅;张丽霞;张虹;黄永红;;SOX9基因的研究进展[J];黑龙江农业科学;2007年03期

3 孙克敏,李彬,刘绍庭;同种异体鼻中隔软骨移植鼓室成形术[J];哈尔滨医科大学学报;1990年02期

4 段小红,吴军正,李 焰,李 峰;永生化髁突软骨细胞的血清依赖性生长实验[J];口腔医学;2002年01期

5 黄志纯,张风兵,贾祝三,曹银成;同种异体鼻中隔软骨在部分喉切除术中的应用[J];临床耳鼻咽喉科杂志;1997年10期

6 张华;宋西成;张庆泉;;导航下经鼻内镜脑脊液鼻漏的修补(附14例报告)[J];山东大学耳鼻喉眼学报;2007年03期

7 张庆泉;;鼻中隔组织瓣的临床应用[J];山东大学耳鼻喉眼学报;2011年05期

8 ;Structure and function of aggrecan[J];Cell Research;2002年01期

9 郭云彩;;下睑部分全层缺损修复[J];中华整形烧伤外科杂志;1997年02期

10 赵华,孙江红,荆建军,曹志平,刘文中;自体鼻中隔软骨贴附移植矫正歪鼻畸形[J];中华整形外科杂志;2003年02期

，

本文编号：681032