NGB和VEGF在糖尿病大鼠视网膜和脑中的表达特征及不同品系小鼠血糖变化特点分析

发布时间：2017-08-18 00:24

  本文关键词：NGB和VEGF在糖尿病大鼠视网膜和脑中的表达特征及不同品系小鼠血糖变化特点分析

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【摘要】：糖尿病是以高血糖为主要特征的慢性代谢性疾病，糖尿病并发症和血糖代谢研究是糖尿病研究中的热点。本文从这两方面出发，分析脑红蛋白（Neuroglobin, NGB）和血管内皮因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）在糖尿病并发症--视网膜病变和脑病中的表达变化和不同品系小鼠血糖代谢特征，旨在为糖尿病视网膜病变和脑病的早期诊断和治疗提供理论依据，并为糖尿病相关研究动物模型的选择提供数据参考。主要研究结果如下： 一、 NGB和VEGF在糖尿病大鼠视网膜和脑中的表达特征 目的：糖尿病诱发的视网膜病变和脑病是两种重要的糖尿病性神经退行性病变，神经功能损伤为其主要特征。糖尿病引起组织损伤的原因主要有三个：高糖、缺氧和氧化应激。NGB是特异性表达于视网膜和脑组织的内源性神经保护因子，具有储存氧气、清除活性氧和活性氮等自由基、传递NO信号等作用。目前对于NGB在糖尿病引起的神经组织损伤中的作用还不清楚。VEGF即能保护神经细胞，又能促进新血管生成，它的表达变化能够反映糖尿病视网膜病变的发展过程。本研究拟通过比较NGB和VEGF在糖尿病大鼠视网膜和脑中的表达变化，分析NGB和VEGF在糖尿病性神经损伤发病过程中的作用，以期找到糖尿病视网膜病变和糖尿病脑病之间可能存在的关联。 方法：选取健康成年雄性SD大鼠42只，，随机分成正常对照组和糖尿病组，用链脲佐菌素（Streptozotocin, STZ）大剂量(55mg/kg)一次性腹腔注射诱导糖尿病模型。将正常大鼠和糖尿病分别随机分成1个月组、3个月组和6个月组。处死大鼠后，固定眼球和脑组织，石蜡包埋并切片。取切片组织进行HE染色光镜下观察视网膜和脑组织的形态变化，并用免疫组织化学方法检测脑红蛋白和VEGF在视网膜和脑组织中的表达。 结果：1、视网膜HE染色结果观察：糖尿病3个月组，部分视网膜神经节细胞细胞核有固缩现象，随着糖尿病病龄的延长，神经节细胞固缩现象更明显，神经节细胞层有血管生成，内、外核层细胞排列稀疏。 2、脑组织HE染色结果观察：在糖尿病6个月时，大鼠压后皮层细胞胞浆出现红染，并有少量细胞出现核固缩现象；海马齿状回区细胞减少，核仁不清晰，细胞核出现固缩现象。 3、NGB在视网膜的表达： NGB在糖尿病大鼠视网膜内、外核层的表达量明显升高，并且随着时间的增长，糖尿病组视网膜内、外核层NGB的表达量也随之上升。 4、NGB在脑中的表达：NGB从1个月起在糖尿病大鼠压后皮层区的表达升高，而海马齿状回区在糖尿病3个月时表达升高。 5、VEGF在视网膜的表达：VEGF从1个月起在糖尿病组视网膜的表达量明显增加，并且随着糖尿病的发展，VEGF在视网膜全层的表达量随之升高。 6、VEGF在脑中的表达：糖尿病组1个月时，VEGF在皮层的表达量略有上升但无统计学差异，从3个月起VEGF表达量明显上升；而在海马齿状回区VEGF表达上升。 结论：1、NGB和VEGF在糖尿病大鼠视网膜和脑的表达量增加，并且随着时间的延长，表达量随之增加。 2、在糖尿病视网膜病变中，NGB主要在视网膜神经节细胞层、内核层和外核层表达，而VEGF在视网膜全层表达。 3、在糖尿病脑病中，NGB的表达要早于VEGF的表达。 4、在糖尿病发病初期，NGB在视网膜和压后皮层的表达呈显著负相关。 二、不同品系小鼠在禁食和/或禁水情况下血糖变化特点的比较分析 目的：比较不同品系小鼠在禁食和/或禁水情况下的血糖变化特点，为研究不同品系动物血糖代谢水平的差异提供参考依据。 方法：选择C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠、ICR小鼠作为研究对象，进行禁食和/或禁水胁迫压力测试，分为正常进食进水组、禁食不禁水组、禁水不禁食组和禁食禁水组共四组，测定胁迫压力后12小时内血糖的变化。 结果与结论：三种品系小鼠血糖变化趋势有所差异，其中C57BL/6J小鼠整体血糖值高于BALB/c和ICR小鼠，BALB/c小鼠的血糖变化相对较为平稳，而ICR小鼠的血糖变化幅度最大。结果提示在进行血糖代谢相关研究中，需同时考虑不同品系动物血糖代谢能力差异，从而选择合适的动物进行研究并对数据进行合理分析和解释。
【关键词】：NGB VEGF 糖尿病视网膜病变 糖尿病脑病 小鼠 血糖
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R587.2;R774.1
【目录】：

• 缩略语表4-5
• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 第一章 NGB 和 VEGF 在糖尿病大鼠视网膜和脑中的表达特征12-55
• 前言12-16
• 材料与方法16-21
• 结果21-44
• 讨论44-55
• 第二章 不同品系小鼠在禁食和/或禁水情况下血糖变化特点的比较分析55-63
• 前言55-56
• 材料与方法56-57
• 结果57-61
• 讨论61-63
• 参考文献63-71
• 第一章 参考文献63-70
• 第二章 参考文献70-71
• 综述71-86
• 参考文献80-86
• 附录86-88
• 主要试剂的配制86-88
• 致谢88-89
• 攻读学位期间发表的学术论文89

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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6 陈U

本文编号：691842