Mincle在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌感染固有免疫阶段作用的研究

发布时间：2017-08-20 12:19

  本文关键词：Mincle在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌感染固有免疫阶段作用的研究

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【摘要】：目的：观察巨噬细胞诱导型C型凝集素因子(monocyte-inducible C-type lectin, mincle)在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌固有免疫阶段的表达情况,探讨其在真菌性角膜炎固有免疫中的作用。 方法：清洁级Wistar大鼠72只,随机分为烟曲霉菌感染组,阴性对照组,空白对照组,取右眼为实验眼,在刮除大鼠角膜上皮后涂以烟曲霉菌菌丝并覆盖自制的角膜接触镜,建立大鼠角膜真菌感染模型,分别于4、8、16、24小时观察大鼠角膜变化情况。采用HE染色观察角膜组织学变化,分别采用Real-time RT-PCR技术免疫组织化学及免疫荧光方法检测角膜上皮mincle受体及炎性因子mRNA及蛋白表达情况。 结果：造模后4小时角膜轻度水肿,随着时间的延长,角膜病变逐渐加重,24小时形成溃疡。Mincle mRNA在正常对照组、损伤各组均有表达,在曲霉菌感染组mincle的表达量明显上升,在16h达到高峰,各时间点比较差距具有统计学意义(p0.05)。TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10、CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL2在正常组及曲霉菌组均有表达,差距具有统计学意义(p0.05)。mincle与TNF-a、IL-1β、il-10、ccl3的表达含量有显著相关性(p0.05)。 结论：1、组织病理学观察和真菌培养证实大鼠烟曲霉菌性角膜炎模型建立成功。2. mincle受体在正常大鼠角膜上皮中存在,烟曲霉菌刺激后可引起表达上调。3.TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10、CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL2在大鼠角膜上皮中存在,且烟曲霉菌刺激后表达上调。4.mincle与TNF-a、IL-1β、IL-10、CCL3司存在明显相关,mincle可能作为模式识别受体参与大鼠真菌性角膜炎的固有免疫阶段。
【关键词】：mincle 固有免疫 角膜上皮 曲霉菌
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R772.21
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第1章 材料与方法7-14
• 1.1 实验材料7-8
• 1.1.1 实验对象7
• 1.1.2 实验主要仪器与设备7
• 1.1.3 实验主要耗材及试剂7-8
• 1.2 实验方法8-13
• 1.2.1 实验动物分组8-9
• 1.2.2 真菌悬液制备9
• 1.2.3 角膜接触镜的制备9
• 1.2.4 动物模型的制备9
• 1.2.5 组织病理学观察9-10
• 1.2.6 免疫组织化学实验方法10
• 1.2.7 免疫荧光化学实验方法10-11
• 1.2.8 Real-time RT-PCR实验方法11-13
• 1.3 统计学方法13-14
• 第2章 结果14-17
• 2.1 动物模型形态学观察结果14
• 2.2 HE染色结果14
• 2.3 免疫组织化学结果14
• 2.4 免疫荧光化学观察结果14
• 2.5 Real-time RT-PCR结果14-17
• 第3章 讨论17-20
• 结论20-21
• 参考文献21-23
• 综述23-34
• 参考文献30-34
• 攻读学位期间的研究成果34-35
• 附录35-41
• 致谢41-42

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 杜兆东;梁涛;赵桂秋;刘建伟;张丽娜;张振华;;真菌性角膜炎病原菌的流行病学调查[J];青岛大学医学院学报;2007年02期

2 ;Effects of COX-2 inhibitor NS-398 on IL-10 expression in rat fungal keratitis[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2011年02期

3 ;The roles of surfactant protein D during Aspergillus fumigatus infection in human corneal epithelial cells[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2012年01期

4 ;Nucleotide oligomerization domain 2 contributes to the innate immune response in THCE cells stimulated by Aspergillus fumigatus conidia[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2012年04期

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本文编号：706589