视网膜光损伤大鼠Bax、BCL-2的表达变化及乌司他丁干预的研究

发布时间：2017-08-22 13:41

  本文关键词：视网膜光损伤大鼠Bax、BCL-2的表达变化及乌司他丁干预的研究

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【摘要】：目的：1制定较为理想的视网膜紫外线光损伤的SD大鼠模型。2研究乌司他丁对大鼠视网膜光损伤的保护作用及机制，为临床应用提供实验依据。 方法：选SD大鼠30只，随机分为Ⅰ组（正常对照组），Ⅱ组（紫外线光照对照组），Ш组为(紫外线光照+乌司他丁组），Ⅱ、Ш组分为光照后3天、7天组，每组各6只大鼠，所有大鼠均在12小时明12小时暗的循环光环境下适应7天，暗适应36小时后Ⅰ组不做任何处理直接处死取材，Ⅱ、Ш组大鼠放入自制光照箱中紫外线照射8小时（9：00-17:00），光照度为2200±138Lux，光照后放入暗室饲养。光照前3天Ш组在每天光照前30分钟腹腔内注射乌司他丁2000Ou/kg，分别于光照后3天，7天处死大鼠，摘取双眼球视网膜组织行HE（苏木素-伊红）染色，光镜下观察视细胞的结构形态改变，分析视网膜外核层厚度（out nuclear layer,ONL）变化，应用免疫组织化学染色法比较视网膜细胞凋亡调控基因Bax、Bcl-2的蛋白表达及分布变化。 结果：1：视网膜形态学结果：Ⅰ组大鼠视网膜结构完整，层次清楚，光感受器细胞内外节排列整齐、规律，分界清晰。内外核层排列紧密，染色均匀，细胞形态规整，Ⅱ组和Ш组随着时间的延长，外核层逐渐变薄，内外节肿胀，，核破裂，排列紊乱。2：视网膜外核层厚度检测；Ⅰ组视网膜外核层厚度最厚，组内各时相差别无统计学意义（P0.05），Ⅱ组和Ш组视网膜外核层随着光照时间的延长，逐渐变薄，组内各时相差别具有统计学意义（P0.05）。3：免疫组化检测：Ⅰ组BCL-2染色强阳性，Bax染色阴性。Ⅱ组Bax随光照时间的延长染色呈持续性增强，BCL-2随光照时间的延长，表达逐渐减弱，与Ⅰ组比较有显著性差异（P0.05)。Ш组与Ⅱ组比较有显著差异，具有上调凋亡基因BCL-2表达，下调Bax表达的作用。 结论：1、光镜下提示：视网膜外核层厚度随光照时间的延长而变薄，细胞核明显变少，排列稀疏、紊乱，说明紫外线光照可导致视网膜光感受器受损，视细胞凋亡。2、乌司他丁可减轻视网膜光损伤，保护视细胞，其机制可能为，通过调节视网膜细胞凋亡基因，导致Bax促进凋亡蛋白减少，BCL-2抑制凋亡蛋白增多，从而抑制视网膜细胞凋亡，起到了保护视网膜光感受器的作用。
【关键词】：乌司他丁 大鼠 视网膜光损伤 ONL Bax Bcl-2 免疫组化
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1
【目录】：

• 中英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一章 前言9-11
• 第二章 材料与方法11-16
• 第三章 实验结果16-22
• 第四章 讨论22-27
• 结论27-28
• 问题及展望28-29
• 参考文献29-33
• 附图33-38
• 综述38-46
• 参考文献43-46
• 读研期间发表的文章46-47
• 致谢47

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本文编号：719479