多西环素对碱烧伤大鼠角膜组织中NF-κB和Bcl-2、Bax表达的影响

发布时间：2017-08-24 13:24

  本文关键词：多西环素对碱烧伤大鼠角膜组织中NF-κB和Bcl-2、Bax表达的影响

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【摘要】：目的：通过建立SD大鼠角膜碱烧伤模型,研究多西环素作用于碱烧伤大鼠角膜组织后核因子NF-κB (nuclear factor kappa B)和抗凋亡因子Bcl-2、促凋亡因子Bax的表达情况及相互关系,探索多西环素诱导炎症细胞凋亡的机制,为多西环素在大鼠碱烧伤中的应用提供了一定的依据和基础。 方法：使用自制模具建立SD大鼠一侧眼角膜碱烧伤动物模型,以0.3%多西环素眼液滴眼为实验组,以0.1%地塞米松眼液滴眼为阳性对照组,以眼液溶媒滴眼为阴性对照组。于烧伤后3天、7天、14天、21天分别随机取4只大鼠,麻醉处死后取下烧伤侧角膜组织,一半角膜组织进行RNA提取,逆转录成cDNA后行RT-PCR,检测角膜组织中Bcl-2基因及Bax基因的表达情况,另一半放入-80℃冰箱保存,各时间点组织标本收集完全后进行酶联免疫吸附实验(ELISA)检测角膜组织中NF-κB的表达情况。 结果：RT-PCR检测显示烧伤后第3天阴性对照组Bcl-2mRNA的相对表达量为0.87±0.15,第7天为0.91±0.14,第14天为0.99±0.13,第21天为1.06±0.37；第3天阳性对照组Bcl-2mRNA的相对表达量为0.57±0.35,第7天为0.20±0.06,第14天为0.72±0.12,第21天为1.05±0.86；第3天多西环素组Bcl-2mRNA的相对表达量为0.30±0.15,第7天为0.22±0.08,第14天为0.42±0.06,第21天为0.74±0.22；烧伤后3天、7天、14天时多西环素组Bcl-2基因与阴性对照组相比表达显著下降(P0.05),有统计学意义；第3天阴性对照组BaxmRNA的相对表达量为1.02±0.42,第7天为1.13±0.48,第14天为1.03±0.34,第21天为1.09±0.27；第3天阳性对照组BaxmRNA的相对表达量为0.69±0.48,第7天为0.25±0.16,第14天为0.77±0.07,第21天为0.77±0.34；第3天多西环素组BaxmRNA的相对表达量为1.88±0.55,第7天为2.18±0.60,第14天为0.94±0.28,第21天为1.27±0.57；烧伤后3天、7天时多西环素组Bax基因与阴性对照组相比表达显著升高(P0.05),有统计学意义；烧伤后3、7天时多西环素组Bax基因与阳性对照组相比表达显著升高(P0.05),有统计学意义。ELISA检测显示烧伤后第3天阴性对照组NF-κB蛋白相对含量为45.87±1.15pg/mL,第7天为47.52±2.34pg/mL,第14天为42.45±3.13pg/mL,第21天为26.74±3.37pg/mL,第3天阳性对照组NF-κB蛋白相对含量为26.57±2.35pg/mL,第7天为18.87±2.34pg/mL,第14天为38.74±3.12pg/mL,第21天为30.47±2.86pg/mL,第3天多西环素组NF-κB蛋白相对含量为23.30±2.15pg/mL,第7天为24.96±7.14pg/mL,第14天为36.21±2.67pg/mL,第21天为28.39±3.22pg/mL;烧伤后3天、7天时多西环素组NF-κB蛋白相对含量与阴性对照组相比表达有显著下降(P0.05),有统计学意义,与阳性对照组各个时间点比较均无显著改变,无统计学意义；烧伤后3天、7天时NF-κB蛋白表达量与Bcl-2mRNA相对表达量呈明显正相关(r=0.746, P0.05; r=0.772, P0.05),第14天、21天时两者无明显相关关系,统计学没有意义。 结论：多西环素作用于碱烧伤大鼠角膜可影响NF-κB、Bcl-2和Bax基因的表达,多西环素可以抑制NF-κB、Bcl-2的表达,上调Bax的表达,这可能是多西环素诱导炎症细胞凋亡,减轻炎症反应的机制之一。
【关键词】：多西环素 碱烧伤 角膜 炎症细胞 凋亡
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R965;R772.2
【目录】：

• 中英文对照4-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-21
• 结果21-25
• 讨论25-31
• 结论31-32
• 展望32-34
• 参考文献34-41
• 综述41-53
• 参考文献49-53
• 致谢53

【参考文献】

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本文编号：731542