TLR4介导的JNK信号通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并高血压大鼠脂肪细胞因子的调控

发布时间：2017-08-30 07:33

  本文关键词：TLR4介导的JNK信号通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并高血压大鼠脂肪细胞因子的调控

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【摘要】：目的：通过观察OSAHS合并高血压大鼠血浆中TNF-α、Leptin水平变化，探讨TOLL样受体4（TLR4）是否通过JNK信号通路对脂肪细胞因子进行调控，借此探索OSAHS合并高血压的可能发病机制。方法：将雄性SD大鼠48只随机分为3组，即：正常对照组、缺氧6周组、缺氧8周组，实验时将实验组大鼠放入密闭玻璃舱内，玻璃舱内充入氮气和氧气,每天缺氧8h,每次循环120秒,将正常对照组大鼠置于相同规格的玻璃舱内，充入空气，无缺氧。于实验前、试验后检测各组大鼠血压。于间歇低氧42、56天后先后处死实验6组和实验8周组大鼠，采用荧光定量PCR、Western-Blotting方法观察脂肪组织中TLR4受体和JNK受体的表达情况，ELISA方法观察大鼠血浆中TNF-α、Leptin含量的变化，HE染色方法观测大鼠肾动脉的病理变化。取间歇低氧8周组大鼠脂肪组织进行原代培养脂肪细胞，通过细胞免疫组织化学以及油红O法鉴定前脂肪细胞和成熟脂肪细胞；分为4组脂肪细胞，即:间歇缺氧8周模型组（缺氧8周组），间歇缺氧8周脂多糖诱导组（LPS诱导组），间歇缺氧8周TLR4阻滞组（TLR4阻滞组），间歇缺氧8周JNK阻滞组（JNK阻滞组）。利用荧光定量PCR法和Western-blot法观察脂肪细胞中TLR4受体、JNK受体mRNA和蛋白质的表达，利用ELISA法观察脂肪细胞培养液中TNF-α、Leptin的含量。结果：1模型组大鼠尾动脉压增加,并且出现肾动脉管腔变小、肾动脉管壁变厚的病理变化,因此成功建立了OSAHS合并高血压大鼠模型。2间歇性缺氧6周组、间歇性缺氧8周组血清TNF-α、Leptin含量比正常对照组显著升高（P0.01，P0.01），且缺氧8周组更显著（P0.05）。3缺氧6周组、缺氧8周组脂肪组织中TLR4受体、JNK受体的表达水平与正常对照组相比明显升高(P0.01，P0.01)。4培养出OSAHS合并高血压模型原代大鼠脂肪细胞；采用油红O染色方法可见脂肪细胞胞内出现红染色颗粒；采用细胞免疫组化可见细胞胞浆着色成棕黄色。5TLR4介导JNK信号通路在脂肪细胞中的表达：与间歇性缺氧8周组相比，脂多糖诱导剂使TLR4受体、JNK受体mRNA和蛋白的表达增加（P0.05, P0.05）；TLR4阻滞剂使TLR4受体、JNK受体mRNA和蛋白的表达减少（P0.05，P0.05）；JNK阻滞剂可以使JNK受体mRNA和蛋白的表达减少（P0.05），而对TLR4受体mRNA和蛋白的表达无意义。6OSAHS合并高血压模型大鼠脂肪细胞中TLR4介导的JNK信号通路对TNF-α、Leptin分泌的调控：脂多糖诱导剂组比间歇缺氧8周组TNF-α、Leptin分泌增加（P0.05），TLR4阻滞剂组、JNK阻滞剂组比间歇缺氧8周组TNF-α、Leptin分泌均减少（P0.05，，P0.05）。结论：TLR4介导的JNK炎症信号通路在OSAHS合并高血压的发生、发展中发挥重要作用，为进一步寻找更有效的治疗方法奠定了基础。
【关键词】：肿瘤坏死因子-α Toll样受体4 高血压 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征 c-Jun氨基末端激酶 瘦素
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R766;R544.1
【目录】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-11
• 英汉缩略词对照表11-12
• 前言12-16
• 1 材料与方法16-27
• 1.1 实验动物16
• 1.2 实验试剂16-17
• 1.3 主要实验仪器17
• 1.4 实验方法17-26
• 1.5 统计学处理26-27
• 2 结果27-38
• 2.1 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征伴高血压大鼠病生理模型的建立27-28
• 2.2 TLR4 介导的 JNK 信号通路在大鼠脂肪组织中的表达28-31
• 2.3 大鼠血浆中 TNF-α、Leptin 含量的变化31
• 2.4 大鼠脂肪细胞原代培养结果和鉴定31-32
• 2.5 TLR4 介导的 JNK 信号通路在大鼠原代脂肪细胞中的表达32-36
• 2.6 TLR4 介导的 JNK 信号通路对脂肪因子 TNF- α、 Leptin 的调控36-38
• 3 讨论38-45
• 3.1 阻塞性呼吸睡眠暂停综合征伴高血压大鼠模型的建立38-40
• 3.2 大鼠原代脂肪细胞的培养及鉴定40-41
• 3.3 TLR4 介导的 JNK 信号通路对脂肪因子 TNF-α、leptin 分泌的调控41-45
• 4 结论45-46
• 参考文献46-54
• 综述54-72
• 参考文献64-72
• 攻读学位期间发表的学术论文目录72-73
• 致谢73-75

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 金燕琴;沈华浩;;阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的危险因素[J];国际呼吸杂志;2006年11期

2 谭胜玉;杨宇;罗荧荃;黄国庆;刘丹;颜素岚;;慢性间歇性缺氧大鼠模型的初步研究[J];中国医学工程;2006年06期

3 钟旭;肖毅;黄蓉;;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征对血管内皮功能及自主神经调制的影响[J];中国医学科学院学报;2010年02期

本文编号：758027