NFBD1在鼻咽癌放射治疗中的价值研究

发布时间：2017-08-31 00:22

  本文关键词：NFBD1在鼻咽癌放射治疗中的价值研究

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【摘要】：目的 观察NFBD1在电离辐射诱导的DNA损伤反应中的作用，从而分析NFBD1对鼻咽癌放射敏感性的影响，并初步探讨其分子机制。 方法 以慢病毒感染的方法将特异性针对NFBD1基因的shRNA转入鼻咽癌细胞，并用嘌呤霉素筛选获得稳定表达的单克隆细胞，采用FCM、克隆形成及彗星实验检测抑制NFBD1联合电离辐射对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响，用免疫荧光、激光共聚焦及Western blot检测抑制NFBD1对电离辐射诱导的DNA损伤修复方式的影响，并初步探索其分子机制。 结果 NFBD1-shRNA慢病毒载体感染后，，鼻咽癌细胞中NFBD1mRNA和蛋白表达水平明显降低。沉默NFBD1联合电离辐射明显提高了细胞的凋亡率及有效抑制细胞的生长（p0.05），并导致G2/M checkpoint的失活，彗星实验显示沉默NFBD1延迟了电离辐射诱导的DNA损失修复，而免疫荧光结果表明沉默NFBD1抑制了电离辐射诱导的非同源末端链接和同源重组修复方式，沉默NFBD1也明显降低了电离辐射诱导的γ-H2AX、p-ATM、Rad51、DNA-PKcs蛋白表达。 结论采用慢病毒感染的方法靶向抑制NFBD1基因可稳定沉默NFBD1的表达，沉默NFBD1基因联合电离辐射可提高鼻咽癌细胞的放射敏感性、G2/M checkpoint失活及延迟DNA损伤修复，并抑制了非同源末端链接和同源重组的修复方式，其分子机制可能是沉默NFBD1打破了NFBD1、γ-H2AX和p-ATM三者构成的正反馈循环，抑制了DNA损伤信号的放大及传导，从而提高了鼻咽癌细胞的放射敏感性。
【关键词】：鼻咽癌 电离辐射 DNA损伤反应 RNA干扰
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 中英缩略语对照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-14
• 第一部分 沉默 NFBD1 联合电离辐射对鼻咽癌细胞生长、G2/M checkpoint、细胞 凋亡及 DNA 损伤程度的影响14-34
• 1 材料与方法14-26
• 2 实验结果26-30
• 3 讨论30-31
• 4 小结31-32
• 参考文献32-34
• 第二部分 沉默 NFBD1 引起鼻咽癌细胞放射敏感性的机制34-43
• 1 材料与方法34-38
• 2 实验结果38-40
• 3 讨论40-41
• 4 小结41-42
• 参考文献42-43
• 全文总结43-46
• 文献综述46-53
• 参考文献50-53
• 致谢53-54
• 硕士期间发表的论文54-55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 邓伟;黄天壬;陈万青;张思维;郑荣寿;利基林;;中国2003—2007年鼻咽癌发病与死亡分析[J];肿瘤;2012年03期

2 邱志利;曾泉;刘学良;胡国华;;NFBD1在鼻咽癌组织中的表达及临床意义[J];重庆医科大学学报;2013年02期

3 刘丹丹;胡国华;刘学良;卜友泉;;抑制NFBD1的表达对鼻咽癌化疗敏感性的影响[J];重庆医科大学学报;2012年05期

本文编号：762368