5-ALA-PDT对鼻咽癌细胞C666-1和CNE2的杀伤效应研究

发布时间：2017-08-31 11:38

  本文关键词：5-ALA-PDT对鼻咽癌细胞C666-1和CNE2的杀伤效应研究

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【摘要】：鼻咽癌是我国南方地区最常见的一种恶性肿瘤,其病因与EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)感染密切相关。在现有的细胞株中,C666-1细胞是唯一一株可以稳定携带EBV的鼻咽癌细胞株,但我们在实验中发现,长期传代的C666-1细胞可能已经不再表达EBV。本学位论文首次选用经QRT-PCR检测证实不携带EBV的C666-1与CNE2以及携带EBV的强阳性C666-1细胞开展5-ALA-PDT实验研究,比较三株鼻咽癌细胞对PDT的响应情况,并对结果进行分析与讨论,为初步探讨EBV在鼻咽癌光动力疗法中的作用机制提供理论基础。 结果表明：EBV+C666-1对5-ALA-PpIX的吸收能力高于EBV-C666-1。三株细胞对PpIX的吸收能力各不相同,同株细胞在不同生长期吸收5-ALA后所生成的PpIX的含量也存在显著差异。三株细胞分别与1mM5-ALA共同孵育4h后,5-ALA-PpIX主要分布在C666-1细胞的线粒体上,而在CNE2细胞中则主要分布于细胞膜。相同实验条件下,5-ALA-PDT对EBV+C666-1细胞的杀伤作用最明显,用低能量密度0.9J/cm2照射细胞时,细胞存活率仅为29%。EBV-C666-1细胞在培养24和48h的PDT实验中,存活率低于CNE2,而在细胞培养72h后的PDT实验中,存活率高于CNE2。 EBV-C666-1细胞的肿瘤恶性程度可能低于EBV+C666-1,影响了其对5-ALA的选择性吸收,从而影响了其对PDT的响应灵敏度。5-ALA是治疗鼻咽癌的良好药物,其在细胞中产生的PpIX的含量和分布是影响5-ALA-PDT疗效的重要因素。
【关键词】：鼻咽癌 光动力疗法 EB病毒 5-氨基酮戊酸
【学位授予单位】：福建师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-4
• 中文文摘4-6
• 目录6-8
• 绪论8-14
• 第1章 C666-1和CNE2细胞的EBV检测14-24
• 1.1 前言14
• 1.2 EBV的检测方法14-18
• 1.2.1 清抗体检测14-15
• 1.2.2 聚合酶链反应(PCR)15-16
• 1.2.3 实时荧光定量PCR16-18
• 1.3 C666-1和CNE2细胞EBV检测18-22
• 1.3.1 材料和仪器设备18
• 1.3.2 EBV-PCR扩增18-19
• 1.3.3 实验结果19-22
• 1.4 本章小结22-24
• 第2章 5-ALA在NPC细胞中的药代动力学研究24-36
• 2.1 前言24
• 2.2 材料与仪器设备24-25
• 2.2.1 主要生化试剂和耗材24-25
• 2.2.2 主要仪器设备25
• 2.2.3 细胞培养25
• 2.3 5-ALA-PpIX在不同生长期细胞内的生成25-31
• 2.3.1 实验方法25-27
• 2.3.2 实验结果27-31
• 2.4 5-ALA-PpIX在NPC细胞中的亚细胞分布31-33
• 2.4.1 实验方法31-32
• 2.4.2 实验结果32-33
• 2.5 结果分析与讨论33-34
• 2.6 本章小结34-36
• 第3章 NPC细胞对5-ALA-PDT的响应比较36-42
• 3.1 前言36
• 3.2 NPC细胞对5-ALA-PDT的响应评估36-38
• 3.2.1 材料与仪器设备36
• 3.2.2 实验方法36-37
• 3.2.3 实验结果37-38
• 3.3 结果分析与讨论38-40
• 3.4 本章小结40-42
• 第4章 全文总结42-44
• 4.1 全文总结42-43
• 4.2 研究工作展望43-44
• 附录144-46
• 附录246-48
• 参考文献48-54
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果54-56
• 致谢56-58
• 个人简历58-59

【参考文献】

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本文编号：765388