SUMO蛋白在体外培养的人晶状体上皮细胞内的表达及对氧化应激的调控作用

发布时间：2017-09-03 14:11

  本文关键词：SUMO蛋白在体外培养的人晶状体上皮细胞内的表达及对氧化应激的调控作用

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【摘要】：目的观察小泛素相关修饰物(SUMO)在体外正常培养的人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)内的表达以及由高糖诱导的氧化应激条件下SUMO的变化,探讨其对氧化应激的调控作用。方法通过免疫细胞化学染色法,检测SUMO1,2/3,4蛋白在正常培养的SRA01/04内的表达及分布;通过RT-PCR法,观察不同浓度和时间高糖处理时SUMO 1~4 mRNA的表达变化。按浓度实验分组:葡萄糖浓度分别为5.5、12.5、25、50 mmol/L作用24 h。按时间实验分组:葡萄糖浓度50 mmol/L作用0、6、12、24 h。将GFP-SUMO2质粒转入细胞后通过CCK8检测法和AV/PI双染流式细胞仪检测高糖(50 mmol/L)处理后,转染与非转染组的细胞存活率和细胞凋亡率。结果免疫细胞化学染色结果 ,SUMO 1~4蛋白在SRA01/04细胞内主要分布于细胞核,SUMO 2/3同时少量分布于胞质;RT-PCR结果可见,与低糖组比较,高糖组随着糖浓度增加SUMO1~SUMO4 mRNA表达增加(P0.05);与50 mmol/L高糖处理0 h比较,随着处理时间增加SUMO1~SUMO4 m RNA表达增加(P0.05)。与非转染组比较,转染GFPSUMO2的SRA01/04经高糖处理后存活率增加,凋亡率降低(P0.05)。结论 SUMO蛋白在SRA01/04内阳性表达,一定程度高糖诱导的氧化应激影响SUMO mRNA表达。
【作者单位】： 中国医科大学附属第四医院眼科;辽宁省晶状体学实验室;
【关键词】： 小泛素相关修饰物 人晶状体上皮细胞 白内障 高糖 氧化应激
【基金】：国家自然科学基金(81170836) 辽宁省自然科学基金(201202260;2013021016)
【分类号】：R776.1
【正文快照】： 白内障是一种常见且严重致盲疾病之一,一般认为氧化损伤是其重要致病途径,晶状体上皮细胞过度凋亡是其重要病理机制[1]。高浓度血糖易导致1型糖尿病患者并发糖尿病性白内障,并加速2型糖尿病患者年龄相关性白内障的形成[2,3],大量实验已证高糖诱导氧化损伤引起晶状体上皮细胞过

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