奈达铂联合放射治疗对人鼻咽癌5-8F细胞作用的实验研究

发布时间：2017-09-06 14:00

  本文关键词：奈达铂联合放射治疗对人鼻咽癌5-8F细胞作用的实验研究

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【摘要】：目的： 通过体外实验研究奈达铂单独或联合X-射线对人鼻咽癌5-8F细胞的细胞增殖动力学影响以及作用机制,初步探讨奈达铂作为放射增敏药物的可能性,为临床上鼻咽癌放射增敏治疗提供实验基础。 方法： 本实验应用MTT法检测奈达铂对人鼻咽癌5-8F细胞的细胞增殖动力学影响,并求得IC10为后续试验提供适合药物浓度；利用细胞克隆形成实验首先得到低剂量奈达铂对人鼻咽癌5-8F细胞的最佳照射时间(T),进而根据合适药物浓度和最佳照射时间再次进行细胞克隆形成实验,并根据实验数据绘制细胞生存曲线,求得放射敏感性相关参数,观察奈达铂的放射敏感性；应用流式细胞术观察低剂量奈达铂单独或联合X-射线对人鼻咽癌5-8F细胞周期及细胞凋亡的影响,运用免疫细胞化学法检测低剂量奈达铂单独或联合X-射线对人鼻咽癌5-8F细胞凋亡蛋白Fas表达的影响,以探讨其作用机制。 结果： 1.MTT法结果显示：分别用不同浓度奈达铂(1、2、4、8、16、32μg/ml)作用人鼻咽癌5-8F细胞24h后,细胞增殖被不同程度的抑制,增值抑制率分别为11.40%、30.63%、38.01%、65.68%、73.43%、81.92%,随药物浓度增加及药物作用时间延长,奈达铂对人鼻咽癌5-8F细胞增殖抑制作用增强。根据细胞增殖抑制率,应用SPSS17.0软件求得奈达铂对人鼻咽癌5-8F细胞的IC50为5.640μg/ml,IC10为1.128μg/ml。 2.细胞克隆形成实验结果显示：最佳照射时间T为24小时,根据实验数据应用Sigmaplot12.0软件绘制细胞生存曲线,求得放射敏感性相关参数(Do、Dq、N):单纯放疗组的参数分别为：1.453Gy、1.216Gy、2.289;1μg/ml奈达铂+放疗组分别为：DO值为0.947Gy、Dq值为0.701Gy、N值为2.087,根据公式计算放射增敏比(SER),1μg/ml奈达铂+放疗组放射增敏比(SER)SERD0、SERDq、SERSF2分别为1.537、1.690、2.068。 3.流式细胞术检测结果显示：(1)X-射线(OGy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)单纯或联合奈达铂作用鼻咽癌5-8F细胞后,其细胞凋亡情况改变应用SPSS17.0进行统计分析,奈达铂+放疗组细胞凋亡率较单纯放疗组显著升高(P0.05),。(2)X-射线(OGy、2Gy、4Gy、6Gy)单纯或联合奈达铂作用鼻咽癌5-8F细胞后,其细胞周期G2/M期分布改变应用SPSS17.0进行统计分析,奈达铂+放疗组细胞凋亡率较单纯放疗组显著升高(P0.05)。 4.细胞免疫化学染色结果显示：X-射线(OGy、2Gy、4Gy、6Gy)单纯或联合奈达铂作用鼻咽癌5-8F细胞后,其细胞Fas蛋白表达情况应用SPSS17.0进行统计分析,奈达铂+放疗组细胞Fas蛋白阳性表达率较单纯放疗组显著上调(P0.05)。 结论： 1.低剂量奈达铂可提高人鼻咽癌5-8F细胞的放射敏感性,其机制可能与低剂量奈达铂可上调细胞内的Fas蛋白表达,从而诱导人鼻咽癌5-8F细胞的凋亡,改变细胞周期分布有关； 2.临床治疗中,奈达铂有可能会成为治疗鼻咽癌的放射增敏剂。
【关键词】：奈达铂 放疗敏感性 人鼻咽癌5-8F细胞 Fas蛋白
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.63;R730.55
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 1 前言11-15
• 2 材料和方法15-22
• 2.1 材料装置15-16
• 2.2 实验方法16-22
• 2.2.1 鼻咽癌细胞株5-8F的细胞培养及受试细胞准备16
• 2.2.2 药物和试剂准备16-17
• 2.2.3 MTT比色法检测5-8F细胞增殖抑制17
• 2.2.4 最佳照射时间T的测定17-18
• 2.2.5 克隆形成试验检测放射敏感性18-19
• 2.2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期19-21
• 2.2.7 免疫细胞化学21
• 2.2.8 统计学分析21-22
• 3 结果22-34
• 3.1 MTT比色法检测5-8F细胞增殖抑制率22-23
• 3.2 最佳照射时间T的测定23-24
• 3.3 克隆形成实验的结果24-26
• 3.4 流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的结果26-27
• 3.4.1 流式细胞仪检测细胞凋亡26-27
• 3.4.2 流式细胞仪检测细胞周期分布27
• 3.5 免疫细胞化学染色检测Fas蛋白表达及结果27-34
• 4 讨论34-40
• 4.1 奈达铂(Nedapaltin)放射增敏可行性分析35-36
• 4.2 奈达铂(Nedapaltin)放射增敏实验结果分析36-38
• 4.2.1 奈达铂合适药物浓度选择36
• 4.2.2 最佳照射时间的选择36-37
• 4.2.3 奈达铂放射增敏作用实验37
• 4.2.4 奈达铂放射增敏作用机制的初步探讨37-38
• 4.3 待探讨问题38-40
• 5 结论40-41
• 参考文献41-45
• 综述45-60
• 参考文献55-60
• 个人简历60-61
• 致谢61

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 林少俊;陈传本;韩露;郑葳;陈梅;潘建基;;鼻咽癌调强放射治疗230例初步结果[J];福建医科大学学报;2007年01期

2 常方方;高明;周云;;奥沙利铂联合顺铂对体外培养BGC-823细胞增殖及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响[J];郑州大学学报(医学版);2009年02期

3 张t，

本文编号：803527