噪声引起的血管纹基质金属蛋白酶变化及其对耳蜗血—迷路屏障的影响

发布时间：2017-09-15 07:34

  本文关键词：噪声引起的血管纹基质金属蛋白酶变化及其对耳蜗血—迷路屏障的影响

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【摘要】：噪声造成听觉系统的永久性损害，是现代化工业国家的重要的职业损害。对噪声性聋分子机制的研究有助于人们更好地理解听觉系统在噪声损伤中的病理生理机制，更有效地进行听觉防护和噪声性听力损失（NIHL）的治疗。 位于血管纹处的血-迷路屏障（BLB）对于调节内耳体液平衡、调控内耳离子转运和维持耳蜗内电位（EP）具有十分重要的作用，血-迷路屏障的损伤是噪声性损伤的早期特征之一。既往的研究发现，基质金属蛋白酶（MMPs）在耳蜗广泛分布。MMPs能够降解细胞外基质（ECM），可能在维持内耳正常听功能方面具有重要作用。 本研究在成功构建噪声性聋动物模型的基础上，利用免疫组织化学方法、免疫荧光技术、耳蜗铺片、耳蜗包埋冰冻切片和激光扫描共聚焦显微镜成像技术，对噪声暴露前后耳蜗血管纹上的MMP-2、MMP-9表达进行对比分析，并观察随之发生的细胞间紧密连接蛋白ZO-1表达的变化和毛细血管通透性的变化。发现MMP-2、MMP-9在正常对照组豚鼠主要分布于血管纹上的边缘细胞层和基底细胞层，而在噪声暴露之后，血管纹三层细胞（边缘细胞、基底细胞和中间细胞）上MMP-2、MMP-9表达量均显著增加，边缘细胞层上的紧密连接蛋白ZO-1结构由致密变得松散和不连续，同时观察到血管纹上毛细血管对血浆蛋白的通透性明显增加，提示ZO-1破坏以及由此带来的细胞与细胞之间紧密连接（TJs）结构的破坏是血-迷路屏障通透性增加的直接原因。 利用转录组学RNA-seq技术对噪声暴露前后豚鼠耳蜗血管纹上MMPs、紧密连接相关蛋白及其转录本进行测序分析，发现对照组和噪声暴露组血管纹之间的基因表达模式有着显著差异。正常对照组血管纹上有15种MMPs相关基因表达，，而在噪声暴露后其中10种MMPs基因表达量上调，5种MMPs基因表达量下调。内源性金属蛋白酶组织抑制因子（TIMPs）有3种在正常对照组血管纹上表达，在噪声暴露后，血管纹上的TIMPs基因表达均增加，而在正常对照组不表达的TIMP-4也出现少量表达。紧密连接蛋白ZO-1、ZO-2、Occludin、Claudin-5和VE-Cadherin在正常对照组豚鼠耳蜗血管纹上均有表达，这与血-迷路屏障的功能一致。在噪声暴露之后，以上TJs相关蛋白的基因表达量均出现上调。 本研究显示，MMPs/TIMPs的平衡对于保持细胞间紧密连接（TJ）的稳定、维持正常血-迷路屏障的功能具有十分重要的作用。噪声暴露后MMPs表达量上调是导致紧密连接蛋白破坏、血管纹上毛细血管渗透性增加的直接原因。但噪声引起血-迷路屏障（BLB）的损伤可能是个非常复杂的过程，众多调控机制参与其中，还需要耳科学者进一步探索。
【关键词】：噪声性耳聋 血管纹 血-迷路屏障 基质金属蛋白酶 紧密连接蛋白
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R764.43
【目录】：

• 目录5-6
• 英文缩略词表6-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 前言12-18
• 参考文献13-18
• 第一部分 噪声引起豚鼠耳蜗血管纹基质金属蛋白酶改变及其对血-迷路屏障通透性的影响18-42
• 引言18
• 材料与方法18-25
• 结果25-34
• 讨论34-37
• 参考文献37-42
• 第二部分 利用 RNA-Seq 分析噪声暴露前后血管纹上 MMPs、紧密连接蛋白及其相关基因的表达差异42-62
• 引言42-43
• 材料与方法43-48
• 结果48-55
• 讨论55-58
• 参考文献58-62
• 文献综述62-76
• 参考文献68-76
• 个人简历76-78
• 致谢78-80

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 白杨;张学渊;;紧密连接蛋白occludin和ZO-1在豚鼠耳蜗外侧壁血管纹中的表达[J];第四军医大学学报;2008年11期

2 李秋霞;罗茂林;李茹柳;陈蔚文;;紧密连接蛋白ZO-1研究概述[J];广州中医药大学学报;2007年06期

本文编号：855177